[发明专利]一种体外构建组织工程软骨用的凝胶状支架配方及制备方法

权利要求书

1.一种体外构建组织工程软骨用的凝胶状支架配方，其特征在于，包括凝胶和添加剂，凝胶为纤维蛋白、胶原蛋白、透明质酸、凝血酶；所述添加剂在培养基的浓度为：

维生素C：233μM～287μM，亚油酸：3.7μM～8.9μM，胆固醇：9μM～17μM，地塞米松：6nM～15nM，乙酰半胱氨酸：43μM～58μM，转铁蛋白：18μg/mL～32μg/mL，亚硒酸钠:22nM～52nM，泛酸钠:13μM～24μM，生物素:28μM～43μM，胰岛素:7μg/mL～18μg/mL，表皮生长因子:2ng/mL～9ng/mL，成纤维生长因子:2ng/mL～9ng/mL，血小板衍生生长因子:2ng/mL～9ng/mL，人血清白蛋白0.5％～2.5％。

2.根据权利要求1所述的一种体外构建组织工程软骨用的凝胶状支架配方，其特征在于，纤维蛋白100mg/ml；胶原蛋白25mg/ml；透明质酸5％；凝血酶50U/ml。

3.根据权利要求1所述的一种体外构建组织工程软骨用的凝胶状支架配方，其特征在于，所述培养基为DMEM/F12。

4.制备方法，其特征在于，所述方法包括：

1)将维生素C，亚油酸，胆固醇，地塞米松，乙酰半胱氨酸，转铁蛋白，亚硒酸钠，泛酸钠，生物素，胰岛素，表皮生长因子，成纤维生长因子，血小板衍生生长因子，人血清白蛋白添加到基础培养基中，使得添加剂在基础培养基中的最终浓度为：

维生素C：233μM～287μM，亚油酸：3.7μM～8.9μM，胆固醇：9μM～17μM，地塞米松：6nM～15nM，乙酰半胱氨酸：43μM～58μM，转铁蛋白：18μg/mL～32μg/mL，亚硒酸钠:22nM～52nM，泛酸钠:13μM～24μM，生物素:28μM～43μM，胰岛素:7μg/mL～18μg/mL，表皮生长因子:2ng/mL～9ng/mL，成纤维生长因子:2ng/mL～9ng/mL，血小板衍生生长因子:2ng/mL～9ng/mL，人血清白蛋白0.5％～2.5％；

2)将纤维蛋白、胶原蛋白、透明质酸和凝血酶用步骤1)中配置的溶液溶解稀释，使其终浓度为纤维蛋白100mg/ml；胶原蛋白25mg/ml；透明质酸5％；凝血酶50U/ml。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，添加剂在基础培养基中的最终浓度为：

维生素C：250μM，亚油酸：4.5μM，胆固醇：13μM，地塞米松：10nM，乙酰半胱氨酸：50μM，转铁蛋白：25μg/mL，亚硒酸钠:30nM，泛酸钠:17μM，生物素:33μM，胰岛素:10μg/mL，表皮生长因子:5ng/mL，成纤维生长因子:5ng/mL，血小板衍生生长因子:5ng/mL，人血清白蛋白1％。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，培养基为DMEM/F12。