[发明专利]一种分泌型Sema4C蛋白及其应用

权利要求书

1.一种分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，所述分泌型Sema4C蛋白为膜型Sema4C蛋白的胞外段，包括SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述一种分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，在SEQIDNO.1所示的氨基酸序列中插入一段标签序列。

3.根据权利要求1或2所述一种分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，所述分泌型Sema4C蛋白以分泌形式存在且能够在人血清中被检测到。

4.一种编码权利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白的核苷酸序列。

5.一种权利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白作为肿瘤标志物的应用。

6.一种权利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白作为肿瘤标志物在乳腺癌术前检测及术后监测中的应用。

7.一种以分泌型Sema4C蛋白为肿瘤标志物的试剂盒，其特征在于，包括以下组成：包被到酶标板上的绵羊抗人Sema4C多克隆抗体、检测抗体为小鼠抗人Sema4C单克隆抗体、链霉亲和素-辣根过氧化物酶标记的驴抗小鼠IgG多克隆抗体、标准品，所述标准品为Sema4C人重组蛋白，所述Sema4C人重组蛋白包括SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。

8.根据权利要求7所述一种以分泌型Sema4C蛋白为肿瘤标志物的试剂盒，其特征在于，

1)所述包被到酶标板上的绵羊抗人Sema4C多克隆抗体，母液浓度为0.2mg/mL，稀释50倍后的工作液的浓度为4ug/mL；

2)检测抗体为小鼠抗人Sema4C单克隆抗体，母液的浓度为0.2mg/mL，利用生物素标记后，使用时，将生物素标记的小鼠抗人Sema4C单克隆抗体稀释500倍得到的工作液浓度为0.4ug/mL；

3)链霉亲和素-辣根过氧化物酶标记的驴抗小鼠IgG多克隆抗体，母液的浓度为0.5mg/mL；

4)标准品，母液的浓度为100ng/uL。

9.根据权利要求7或8所述一种含有分泌型Sema4C蛋白的试剂盒，其特征在于，还包括包被缓冲液、洗涤液、封闭液、加样缓冲液、显色液、反应终止液。

10.根据权利要求9所述一种以分泌型Sema4C蛋白为肿瘤标志物的试剂盒，其特征在于，

1)所述包被缓冲液为磷酸盐缓冲液，其成分为140mMNaCl、2.7mMKCl、10mMNa₂HPO₄、1.8mMKH₂PO₄，pH值为7.4；

2)所述洗涤液为添加了体积分数为0.05％的Tween-20的包被缓冲液；

3)所述封闭液为含有体积分数为1％的牛血清白蛋白的包被缓冲液；

4)所述加样缓冲液的成分为50mMTris-HCl、0.5MKCl、体积分数为1％的牛血清白蛋白、体积分数为0.05％的Tween-20，pH值为8.4；

5)所述反应终止液的成分为2MH₂SO₄。