[发明专利]一种从猪血球中制备脱色脱苦蛋白肽的方法在审
| 申请号: | 201510693738.5 | 申请日: | 2015-10-24 |
| 公开(公告)号: | CN105177098A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
| 发明(设计)人: | 邓小玲;陈传云;其他发明人请求不公开姓名 | 申请(专利权)人: | 重庆都好生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14;C12R1/46;C12R1/865 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 402260 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 猪血 制备 脱色 蛋白 方法 | ||
1.一种从猪血球中制备脱色脱苦蛋白肽的方法,其特征是包括以下步骤:
(1)溶血:采集新鲜猪血,以5g/L的柠檬酸钠抗凝,在4℃、8000r/min离心10min,收集下层沉淀,以获得红血球;将红血球加入同等体积的生理盐水冲洗并离心两次后加入2倍体积的蒸馏水,超声波细胞破碎辅助溶血20min,然后在4℃、4000r/min离心10min,得到血红蛋白溶液,于4℃保存备用;
(2)酶解:取血红蛋白溶液,加入适量的胰蛋白酶酶解,搅拌,2mol/LNaoH溶液维持体系pH8.0,45-50℃,6-10h;将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10~15分钟,再迅速冷却至50℃以下,调节pH值至7.0左右,8000r/min离心15min,获得上清酶解液,4℃冷藏备用;
(3)脱色:活性炭用量为酶解液总重的5-30%,温度55℃,搅拌脱色20-30min;过滤处理后得脱色酶解液;
(4)发酵:
a.将脱色酶解液中,加入蛋白肽重量(固含)1~9%的蔗糖与氯化钠的混合物;
b.将上述溶液升温至10-60℃,再加入溶液总重量0.5~10%的乳酸菌或酵母菌充分搅拌均匀,使溶液保温发酵至pH3—5时停止发酵;
(5)干燥:采用喷雾干燥的方法使上述发酵好的蛋白肽干燥即得。
2.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法,其特征是:所述步骤(2)中胰蛋白酶是酶比活力25×104u/g。
3.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法,其特征是:所述步骤(2)中胰蛋白酶加酶量是2000U/g(蛋白含量)。
4.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法,其特征是:步骤(4)中所述的蔗糖与氯化钠的比例为l:1—9:l。
5.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法,其特征是:所述乳酸菌为乳酸链球菌、嗜热链球菌、保加刹亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、葡聚糖明串珠菌、丁二酮乳酸链球菌、嗜柠檬酸明串珠菌中的一种或任意两种以上的组合。
6.根据权利要求1所述的一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法,其特征是:所述酵母菌为面包酵母、啤酒酵母中的任何一种或两种的组合。
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