[发明专利]从尿液中提取尿激酶和乌司他丁的方法在审
申请号: | 201510691424.1 | 申请日: | 2015-10-23 |
公开(公告)号: | CN105238771A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 张昭 | 申请(专利权)人: | 张昭 |
主分类号: | C12N9/72 | 分类号: | C12N9/72;C07K14/81 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 050000 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 尿液 提取 尿激酶 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物提取技术,尤其涉及一种从尿液中提取尿激酶和乌司他丁的方法。
背景技术
近年来,在男尿中提取尿激酶、乌司他丁等蛋白酶粗品的公司和个人很多,但普遍存在着提取尿激酶、乌司他丁粗品的技术欠佳,致使尿激酶、乌司他丁的提取量小,活性低,造成大量的浪费,影响尿液的经济价值的问题。因此,如何提高尿激酶、乌司他丁粗品的提取产量和质量,是一项非常具有应用前景的研究。该项研究可使收集的尿液,变废为宝,将尿液的经济价值进一步提升。
发明内容
本发明所解决的技术问题在于提供一种从尿液中提取尿激酶和乌司他丁的方法,其可改善尿液提取的产量和质量,大大提升尿液的经济价值。
为解决上述技术问题,本发明采用一种从尿液中提取尿激酶和乌司他丁的方法,包括:
收集尿液并调节其PH值至6.0-6.5之间;
在尿液中加入粉末状硅胶并搅拌,使尿液中的尿激酶蛋白被硅胶吸附;
通过过滤方式获取尿液中的硅胶并调节过滤后的尿液的PH值至5.3-5.7之间;
在前述过滤后的尿液中加入甲壳素并搅拌,使尿液中的乌司他丁蛋白被甲壳素吸附;
从前述硅胶和甲壳素上分别获取尿激酶蛋白液和乌司他丁蛋白液;
将尿激酶蛋白液加入到饱和水中提取得到尿激酶,在乌司他丁蛋白液中加入硫酸铵提取得到乌司他丁。
作为本技术方案的进一步改进,收集尿液并调节其PH值至6.0-6.5之间,具体包括:
利用免冲水小便器和管道收集尿液;
用盐酸调节尿液的PH值至6.3。
作为本技术方案的进一步改进,在尿液中加入粉末状硅胶并搅拌,具体包括:以每吨尿液中加入20-25公斤硅胶的比例,将硅胶与尿液混合在一起并搅拌。
作为本技术方案的进一步改进,通过过滤方式获取尿液中的硅胶并调节过滤后的尿液的PH值至5.3-5.7之间,具体包括:
用纱布口袋过滤所述尿液,并收集吸附有尿激酶蛋白的硅胶,采用分次注入盐酸的方式将过滤后的尿液的PH值调节至5.5。
作为本技术方案的进一步改进,在前述过滤后的尿液中加入甲壳素并搅拌,具体包括:
以每吨尿液中加入5公斤甲壳素的比例,将甲壳素与尿液混合在一起并搅拌,并分次加入盐酸和消泡剂,使尿液PH值保持在5.5。
作为本技术方案的进一步改进,从前述硅胶和甲壳素上分别获取尿激酶蛋白液和乌司他丁蛋白液,具体包括:
用纱布口袋收集吸附有尿激酶蛋白的硅胶,并对硅胶进行层析处理得到含有尿激酶蛋白的层析液,再对层析液进行洗脱处理得到尿激酶蛋白液;
用纱布口袋收集吸附有乌司他丁蛋白的甲壳素,将甲壳素用清水浸洗,并对甲壳素进行洗脱处理,得到乌司他丁蛋白液。
作为本技术方案的进一步改进,对硅胶进行层析处理,具体包括:
将硅胶注入层析柱内,用清水洗涤硅胶,再按硅胶和清洗液的比例不低于1:8的配比用清洗液清洗,得到含有尿激酶蛋白的层析液,所述清洗液按每50公斤水加入82克磷酸二氢钠调配并加入氨水调制PH值至8.9±0.1。
作为本技术方案的进一步改进,对层析液进行洗脱处理,具体包括:
按1升硅胶配3升洗脱液的比例,用洗脱液对层析液中的尿激酶蛋白进行洗脱收集,得到尿激酶蛋白液,所述洗脱液按每50公斤水加入3.5公斤氯化铵调配并加入氨水调制PH值至10.0-11.0。
作为本技术方案的进一步改进,对甲壳素进行洗脱处理,具体包括:
将吸附有乌司他丁蛋白的甲壳素放入洗脱液中搅拌,释放出被吸附的乌司他丁蛋白,所述洗脱液由二次饱和水与水按1:2的比例混合而成,并加入片碱调制PH值至9.0-10.0。
作为本技术方案的进一步改进,将尿激酶蛋白液加入到饱和水中提取得到尿激酶,具体包括:按1升尿激酶蛋白液配2升饱和水的比例,将所述尿激酶蛋白液加入到饱和水中,经至少10小时静置后,采用含浸湿硅藻土的真空漏斗过滤提取尿激酶;
在乌司他丁蛋白液中加入硫酸铵提取得到乌司他丁,具体包括:将释放出乌司他丁蛋白的液体中加入工业用硫酸铵并搅拌均匀,且比重保持在26-28之间,经至少5小时静置后,采用含浸湿硅藻土的真空漏斗过滤提取乌司他丁。
本发明在尿液中提取尿激酶粗品和乌司他丁粗品,增加了提取的产量和质量,大大提高了尿液的经济价值。
附图说明
图1为本发明所述的从尿液中提取尿激酶和乌司他丁的方法的流程图。
具体实施方式
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