[发明专利]活动性结核病诊断分子的筛选与应用

权利要求书

1.一种结核阳性抗原组合，其特征在于，所述的抗原组合为氨基酸序列分别如SEQ IDNO：1、2、3、4、5和6所示的6种多肽的组合或其相应的融合蛋白或融合多肽。

2.一种如权利要求1所述的结核阳性抗原组合的用途，其特征在于，所述抗原组合用于制备检测活动性结核的试剂或试剂盒。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸选自下组：

(a)编码权利要求1所述阳性抗原或抗原组合的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

4.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求3所述的多核苷酸。

5.一种宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求4所述的载体，或其染色体整合有权利要求3所述的多核苷酸。

6.一种制备结核分枝杆菌阳性抗原的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)在适合表达的条件下，培养权利要求5所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出所述的结核分枝杆菌阳性抗原。

7.一种用于检测活动性结核的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：容器或载体；以及位于所述容器内或载体上的如权利要求1所述的阳性抗原组合。

8.一种检测活动性结核的试剂，其特征在于，所述试剂包括：固相载体以及包被于所述固相载体上的权利要求1所述的阳性抗原组合。

9.一种标准品，其特征在于，所述标准品选自下组：

(i)活动性结核抗原，所述活动性结核抗原为氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1、2、3、4、5和6所示的6种多肽的组合；

(ii)由(i)中的活动性结核抗原与相应抗体形成的抗原-抗体复合物。

10.一种抗体组合，其特征在于，所述抗体组合包括n个抗体，所述抗体分别特异结合于权利要求1所述的活动性结核抗原组合中的活动性结核抗原，其中，n为6。

11.如权利要求10所述的抗体组合的用途，其特征在于，用于：

(a)制备检测活动性结核的试剂或试剂盒；和

(b)用作活动性结核的阳性抗体对照。

12.一种高通量筛选结核分枝杆菌抗原的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)将含有信号肽或跨膜区的候选蛋白抗原与标志蛋白GST进行融合表达；

(2)将步骤(1)得到的融合蛋白置于螯合了GSH的多孔板的孔中，从而捕获GST融合蛋白；

(3)将含有结核分枝杆菌抗体的血清置于步骤(2)的多孔板的孔中；

(4)筛选形成特异性抗原-抗体复合物的孔，所对应的候选蛋白即为权利要求1所述的结核分枝杆菌阳性抗原。