[发明专利]焦磷酸测序法检测CYP3A5基因分型的引物对及试剂盒在审
| 申请号： | 201510675438.4 | 申请日： | 2015-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN105176991A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 滕祥云;陈艳 | 申请（专利权）人： | 长沙三济生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
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| 地址： | 410013 湖南省长沙市*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磷酸 测序法 检测 cyp3a5 基因 引物 试剂盒 | ||
1.一种焦磷酸测序法检测CYP3A5基因分型的引物对，其特征在于，所述CYP3A5基因检测的多态性位点为CYP3A5*3，所述引物对包括：
正向扩增引物：5’-AGCTTAACGAATGCTCTACTGTCA-3’；
反向扩增引物：5’-CAGGAAGCCAGACTTTGATCATT-3’；
测序引物：5’-CCAAACAGGGAAGAGATA-3’；
其中，所述正向扩增引物的5’端进行生物素标记。
2.一种焦磷酸测序法检测CYP3A5基因分型的试剂盒，其特征在于，所述CYP3A5基因检测的多态性位点为CYP3A5*3，所述试剂盒包括：
正向扩增引物：5’-AGCTTAACGAATGCTCTACTGTCA-3’；
PCR反应液，所述PCR反应液含有反向扩增引物：5’-CAGGAAGCCAGACTTTGATCATT-3’；
测序引物：5’-CCAAACAGGGAAGAGATA-3’；
其中，所述正向扩增引物的5’端进行生物素标记。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：
CYP3A5*3阳性对照品1，其为插有SEQIDNO.5所示核苷酸序列的CYP3A5*3野生纯合子质粒；
CYP3A5*3阳性对照品2，其为所述CYP3A5*3野生纯合子质粒与插有SEQIDNO.6所示核苷酸序列的CYP3A5*3突变纯合子质粒组成的质粒混合物；
CYP3A5*3阳性对照品3，其为插有SEQIDNO.6所示核苷酸序列的CYP3A5*3突变纯合子质粒；
其中，质粒载体为pMD18-T质粒。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述CYP3A5*3阳性对照品2中所述CYP3A5*3野生纯合子质粒和所述CYP3A5*3突变纯合子质粒的数量比为1:1。
5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：质控品和空白对照品，所述质控品的序列为：TAYGGTTTGCA。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述空白对照品为水。
7.权利要求1所述的引物对在制备用于检测CYP3A5基因分型的试剂中的应用。
8.权利要求2所述的试剂盒在制备用于检测CYP3A5基因分型的试剂中的应用。
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