[发明专利]炭疽毒素受体CMG2与人血清白蛋白的融合蛋白有效
| 申请号: | 201510665971.2 | 申请日: | 2015-10-15 |
| 公开(公告)号: | CN105237640B | 公开(公告)日: | 2019-01-18 |
| 发明(设计)人: | 陈薇;徐俊杰;李亮亮;郭强;张军;董大勇;殷瑛;付玲 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/81;C12N1/19;C07K1/22 |
| 代理公司: | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人: | 李新军 |
| 地址: | 100071*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 炭疽 毒素 受体 cmg2 血清 白蛋白 融合 蛋白 | ||
1.一种融合蛋白,所述融合蛋白第一部分为重组炭疽毒素受体CMG2,第二部分为重组人血清白蛋白,所述第一部分位于融合蛋白的C末端,第二部分位于融合蛋白的N末端,所述第一部分与第二部分由连接肽连接,连接肽为(G4S)n,其中n=3,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种表达权利要求1所述融合蛋白的核苷酸编码序列,其特在于,所述序列如SEQ IDNO:2所示。
3.一种含有权利要求2所述序列的真核表达载体,其特征在于,所述载体为pMEX9K。
4.一种含有权利要求3所述载体的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为毕赤酵母菌GS115。
5.一种表达权利要求1所述融合蛋白的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)以PCR重叠扩增法构建所述融合蛋白的表达载体;
(2)将步骤(1)获得的载体转化入宿主细胞;
(3)诱导步骤(2)获得的被转化的宿主细胞表达所述融合蛋白;
(4)收集和纯化所述融合蛋白。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述的表达载体是在pMEX9K的基础上构建的。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述宿主细胞为毕赤酵母菌GS115。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(4)所述的纯化为亲合层析柱Blue-Sepharose和Q-HP柱的两级纯化。
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