[发明专利]一种猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒及其用途

权利要求书

1.一种猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒，包括位于背板上的试剂条，试剂条从加样端开始依次为样品垫、标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、包被有抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸，所述免疫荧光探针为抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体包被的近红外荧光乳胶微球颗粒。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上包被的抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体和所述近红外荧光乳胶微球颗粒上包被的抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体可以为相同的抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体，也可以为不同的抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光乳胶微球颗粒的直径为140—160nm。

4.如权利要求1-3任一权利要求所述的猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

用缓冲液将荧光乳胶微粒离心清洗并将乳胶颗粒分散，在清洗好的乳胶颗粒分散液中加入抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体；加入EDCA使抗体与颗粒偶联；再加入封闭液封闭乳胶颗粒上多余的基团，制备获得探针溶液；

将含有抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的缓冲溶液喷加到硝酸纤维素膜上，烘干备用；

将步骤1制备获得的探针溶液浸润玻璃纤维薄膜，干燥备用；

将步骤2所得的硝酸纤维素膜、步骤3所得的标记有免疫荧光探针的玻璃纤维素膜、样品垫、吸水纸及背板组装制备成猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，再加入封闭液封闭乳胶颗粒上多余的基团，并加入冠醚，制备获得探针溶液，所述冠醚选自二环已基-18-冠-6，15-冠 醚-5，18-冠醚-6中的一种或多种的组合；

和/或，步骤1制备获得的探针溶液中冠醚的浓度为0.1~20mg/ml；

和/或，所述步骤1中，缓冲液为PBS缓冲液；

和/或，所述步骤1中，乳胶颗粒、抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体、EDCA的重量比为9-11：0.9-1.1：0.9-1.1；和/或，所述步骤1中，缓冲液为PBS缓冲液；

和/或，所述封闭液为乙醇胺。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，含有抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的缓冲溶液中还含有冠醚，所述冠醚选自二环已基-18-冠-6，15-冠 醚-5，18-冠醚-6中的一种或多种的组合；

和/或，所述含有抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的缓冲溶液中冠醚的浓度为0.1~20mg/ml；

和/或，含有抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的缓冲溶液中抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的浓度为1.8—2.2mg/ml；

和/或，抗猪伪狂犬病病毒单克隆抗体的缓冲溶液的喷加量为0.9-1.1μL/cm；

和/或，所述步骤2中，所述缓冲溶液为PBS缓冲液。

7.如权利要求1-3任一权利要求所述的猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒在猪伪狂犬病病毒检测领域的用途。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述用途具体为使用所述猪伪狂犬病病毒近红外荧光检测试剂盒对样品中的猪伪狂犬病病毒进行检测，所述样品选自人全血、血清或血浆中的一种或多种的组合。