[发明专利]一种亚硝酸细菌的保藏方法

权利要求书

1.一种亚硝酸细菌的保藏方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）在亚硝酸细菌培养过程中投加生长促进剂，所述生长促进剂包括金属盐、多胺类物质、有机酸羟胺和Na₂SO₃，所述金属盐包括钙盐、铜盐、镁盐和/或亚铁盐；所述的多胺类物质为精胺、亚精胺或者两者的混合物；所述有机酸羟胺为甲酸羟胺、乙酸羟胺或者两者的混合物；培养至氨氮去除率达99%、亚硝化率达80%时，收集菌体；

（2）配制亚硝酸细菌保藏营养液；

（3）将步骤（1）收集的亚硝酸细菌与步骤（2）配制的保藏营养液混合，控制pH为7.5-9.0，含水率为40%-80%；

（4）添加保藏剂；

（5）低温冷冻保藏。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的亚硝酸细菌的培养采用间歇式活性污泥法；采用人工配置的培养液或者采用含氨氮废水对亚硝酸细菌进行培养；培养液所含成分主要为铵盐，氨氮浓度为200-1500mg/L。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的亚硝酸细菌的培养pH值为7.0-8.5，温度为30-40℃，溶解氧浓度为1-5mg/L，培养时间为1-10天；培养结束后，通过沉降、过滤或离心方法收集获得的菌体。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述生长促进剂中金属盐为40-100重量份，多胺类物质为5-30重量份，有机酸羟胺为0.05-1.5重量份，Na₂SO₃为10-40重量份。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述生长促进剂中金属盐为钙盐、镁盐和铜盐，其中Ca²⁺、Mg²⁺和Cu²⁺的摩尔比为（5-15）:（5-25）:（0.5-5）；或者是钙盐、亚铁盐和铜盐，其中Ca²⁺、Fe²⁺和Cu²⁺的摩尔比为（5-15）:（1-8）:（0.5-5）；或者是钙盐、镁盐、亚铁盐和铜盐，其中Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺和Cu²⁺的摩尔比为（5-15）:（5-25）:（1-8）:（0.5-5）；所述的钙盐为CaSO₄或者CaCl₂；镁盐为MgSO₄或者MgCl₂；亚铁盐为FeSO₄或者FeCl₂；铜盐为CuSO₄或者CuCl₂。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述生长促进剂加入量按照培养体系中促进剂浓度10-50mg/L进行补加。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）中亚硝酸细菌与保藏营养液混合后，采用碳酸氢钠、碳酸钠或氢氧化钠调节pH。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）所述亚硝酸细菌与保藏营养液混合物中，NH₄⁺-N浓度为 0.1-1.5g/L，Fe²⁺浓度为0.01-0.03g/L，K⁺浓度为0.05-0.5g/L，Ca²⁺浓度为0.01-0.05g/L，Mg²⁺浓度为0.05-0.25g/L。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）所述的保藏剂是二甲基亚砜，使用量为硝化细菌与保藏营养液混合物体积的0.5%-3%；低温冷冻保藏温度为-20～-70℃。