[发明专利]碱性磷酸酶(NAP)染色液(化学染色法)有效
| 申请号： | 201510631201.6 | 申请日： | 2015-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN105181423B | 公开（公告）日： | 2018-04-17 |
| 发明（设计）人： | 谢永华;朱美萍;许付 | 申请（专利权）人： | 上海太阳生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 201108 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 碱性磷酸酶 nap 染色 化学 | ||
1.一种中性粒细胞碱性磷酸酶染色试剂盒，其特征在于，包括pH值为9.2-9.8的碱性磷酸酶底物溶液，所述碱性磷酸酶底物为N-(2-甲基-5-甲氧基-4-联苯基)-3-磷酸氧基-2-萘甲酰胺。
2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶底物溶液中还包括基质缓冲液、稳定剂、防腐剂和无机盐。
3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述基质缓冲液选自Tris-HCl缓冲液、2-氨基-2-甲基-1,3丙二醇缓冲液、巴比妥缓冲液、碳酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种。
4.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述无机盐为氯化钠或氯化镁。
5.根据权利要求1-4任意一项所述试剂盒，其特征在于，还包括固定液、重氮盐和苏木素复染液。
6.一种中性粒细胞碱性磷酸酶染色方法，其特征在于，包括：
步骤1、向新鲜待测血液涂片滴加固定液固定，固定后水洗待干；
步骤2、将重氮盐置入pH值为9.2-9.8的碱性磷酸酶底物溶液中完全溶解，混合成为染色工作液，将固定后血液涂片置入染色工作液中孵育，之后流水冲洗，取出待干；
步骤3、向血液涂片中滴加苏木素复染液复染，水洗待干，镜检；
其中，所述碱性磷酸酶底物为N-(2-甲基-5-甲氧基-4-联苯基)-3-磷酸氧基-2-萘甲酰胺。
7.根据权利要求6所述染色方法，其特征在于，重氮盐与N-(2-甲基-5-甲氧基-4-联苯基)-3-磷酸氧基-2-萘甲酰胺的摩尔浓度比为2:1～8:1。
8.根据权利要求6所述染色方法，其特征在于，所述碱性磷酸酶底物溶液中还包括基质缓冲液、稳定剂、防腐剂和无机盐。
9.根据权利要求8所述染色方法，其特征在于，所述基质缓冲液选自Tris-HCl缓冲液、2-氨基-2-甲基-1,3丙二醇缓冲液、巴比妥缓冲液、碳酸缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种。
10.根据权利要求8所述染色方法，其特征在于，所述无机盐为氯化钠或氯化镁。
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