[发明专利]一种蒽醌类化合物的制备方法及作为受体酪氨酸激酶抑制剂的应用

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种蒽醌类化合物、制备方法及其作为受体酪氨酸激酶抑制剂的应用以及抗肿瘤药物的研制。属于生物工程和药物化合物领域。

背景技术

受体酪氨酸激酶(receptortyrosinekinase,RTKs)是最大的一类酶联受体，它既是受体，又是酶，能够同配体结合，并将靶蛋白的酪氨酸残基磷酸化。受体酪氨酸激酶的胞外区是结合配体结构域，配体是可溶性或膜结合的多肽或蛋白类激素，包括胰岛素和多种生长因子。胞内段是酪氨酸蛋白激酶的催化部位，并具有自磷酸化位点。配体在胞外与受体结合并引起构象变化，导致受体二聚化形成同源或异源二聚体，在二聚体内彼此相互磷酸化胞内段酪氨酸残基，激活受体本身的酪氨酸蛋白激酶活性。

目前与发现50多种不同的受体酪氨酸激酶，主要的几种类型包括：表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)受体、血小板生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)受体和巨噬细胞集落刺激生长因子(macrophagecolonystimulatingfactor,M-CSF)、岛素和胰岛素样生长因子-10(insulinandinsulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)受体、神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)受体、成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)受体、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)受体和肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)受体等。其中表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR-1)和肝细胞生长因子受体(c-Met)是3种重要的受体酪氨酸激酶，在多种肿瘤细胞中过度表达，现已证实是极有希望的抗肿瘤药物分子靶点。本发明提供了一种蒽醌类化合物作为这3种受体酪氨酸激酶抑制剂应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蒽醌类化合物的制备方法及其作为表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR-1)和肝细胞生长因子受体(c-Met)3种重要的受体酪氨酸激酶抑制剂的应用。

所述的蒽醌类化合物包括如下如下结构式的化合物，即式(1)-式(8)：

本发明还提供一种蒽醌类化合物的制备方法，包括：

(1)将活化后的斜面菌种在无菌操作环境下，用接种针划取0.5cm×0.5cm的菌块接种于装有100mL马铃薯液体培养基(PDB)的种子摇瓶中，置于转速为120r/min的恒温振荡器中，在28℃下恒温培养4天，得到种子液。

(2)将液体种子接种于装有发酵培养基的500mL的三角瓶中培养；培养基质用有机溶剂提取，合并提取液，减压浓缩，即为菌体固体发酵的粗提物。

(3)粗提物经色谱分离获得蒽醌类化合物。

所述步骤(1)中的微生物为Nigrosporasp.BM2，分离自宜昌市禾本科植物斑茅(SaccharumarundinaceumRetz.)。

所述步骤(1)中的斜面培养基为马铃薯琼脂培养基(PDA)，即将200g/L的去皮土豆浆液与20g/L的葡萄糖和20g/L琼脂经热溶混匀制得，pH自然。

所述步骤(1)中的种子培养基为马铃薯液体培养基(PDB)，即将200g/L的去皮土豆浆液与20g/L的葡萄糖经混合后制得，pH自然。

所述步骤(2)中最优发酵培养基组成为葡萄糖20.0g/L，酵母8.0g/L，无水MgSO₄0.05％，KH₂PO₄0.01％，NaCl0.5％；置于转速为120r/min的恒温振荡器中，在28℃下恒温培养9天。采用该方法得到的化合物式1的最大产量为86.25±7.23mg/L。

所述步骤(2)中的大米培养基，即500mL三角瓶，每瓶40g大米，80mL自来水，pH自然，25℃静置培养20天。

所述步骤(2)中液体发酵基质提取方法为，发酵液过滤去除菌丝体，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，减压浓缩，即为菌体液体发酵的粗提物。