[发明专利]一种检测及鉴别驴、马或牛皮气味成分的方法及其鉴别标准

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测及鉴别驴、马或牛皮气味成分的方法及其鉴别标准，具体为用顶空固相微萃取-气相色谱/质谱联用技术通过挥发性成分分析鉴别驴、马和牛皮的方法，本发明属于分析检测技术领域。

背景技术

2010年版《中国药典》规定^[1]，阿胶为马科动物驴EquusasinusL.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。而驴皮的质量标准一直未纳入《中国药典》。由于经济利益的驱动，市场上时常出现以牛皮、马皮及混杂皮制成的以次充好的阿胶，在损害消费者利益的同时，也给阿胶的质量控制带来新的难题。本课题在企业的生产中，最常用的驴皮鉴别方法是性状鉴别。而对于干燥的碎皮而言，鉴别的难度加大，即使是很有经验的技术人员也很难区分驴和牛、马的皮张。而驴和牛、马的身体的生理构造不同，生活的环境也有差异，因而其体味的差别较大。目前关于驴皮的气味鉴别的研究尚未见报道。

固相微萃取(solid-phasemicroextraction，SPME)技术属于非溶剂型选择性萃取法，具有集采样、吸附、萃取、浓缩、进样于一体，能够与GC、GC/MS、HPLC、HPLC/MS联用，免溶剂、快速、操作简单的突出优势而广泛应用于环境、食品、水产品、中药等挥发性成分的测定^[2-6]。

发明内容：

本发明旨在提供一种检测驴马牛皮气味成分的方法、鉴别标准及方法，采用顶空固相微萃取技术提取驴、马和牛皮的气味成分即为挥发性成分，采用气相色谱-质谱联用的方法检测其组成，探讨其气味构成的物质基础，找出其主要差异组分，为驴皮的质量控制提供初步的数据和理论根据，解决阿胶生产中如何控制好驴皮的质量，保证阿胶生产的原料来源的准确性和可靠性的问题。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种检测驴、马或牛皮气味成分的方法，该方法是用顶空固相微萃取-气相色谱/质谱联用技术，该技术步骤为：

1)原料预处理；

2)顶空固相微萃取：将样品加入顶空瓶中，插入纤维头，调整并固定萃取头在顶空体积中的位置，进行萃取；

3)气相色谱/质谱联用检测：调节色谱条件和质谱条件，对步骤2)中的萃取挥发性组分进行检测并分析鉴定。

本发明还有以下附加技术特征：

优选的，所述的原料预处理为分别将驴、马或牛的皮张上的毛发剪去，用水漂洗干净，再用去离子水冲洗，置40℃烘箱中烘干至恒重，剪成小块，粉碎机粉碎，过100目筛。

优选的，所述顶空固相微萃取方法为：萃取纤维头在气相色谱的进样口240℃老化30min，再在与检测样品相同的色谱条件下做数次空白，直到解析空白萃取头的色谱峰不发生变化，10mL顶空瓶中加入准确称取的1g皮张样品，50℃下平衡30min，插入65μmPDMS/DVB纤维头，调整并固定萃取头在顶空体积中的位置，于50℃萃取30min。

优选的，所述色谱条件为：色谱柱：Agilent19091J-433-HP-5毛细管柱(30m×250μm×0.25μm)；升温程序：60℃保持2min，5℃/min升至230℃，保持20min；载气(He)流速1.0mL/min，进样口温度：250℃；进样方式：不分流进样；解吸时间：5min。

优选的，所述质谱条件为：电子轰击(EI)离子源；电子能量70eV；传输线温度230℃；离子源温度170℃；离子肼温度150℃，质量扫描范围m/z30～800。

优选的，上述步骤3)中所述分析鉴定方法为：对总离子流图中各峰经过质谱扫描后，获得全扫描质谱图，解析图谱获得相关数据，通过与质谱数据系统NIST和Willey标准图谱数据库比较对挥发性组分进行定性定量，确定驴皮、马皮或牛皮中的挥发性组分及含量。

优选的，采用积分面积归一化的方法确定各组分在挥发性组分中的相对百分含量。

本发明还提供了一种利用气味成分鉴别驴皮的标准，该标准用于将获取的挥发性组分与其标准的参数相匹配，该标准包括以下参数：