[发明专利]一种人免疫球蛋白的IgM组分及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及血液制品的制备方法，特别涉及一种人免疫球蛋白的IgM组分及其制备方法。

背景技术

富含IgM的人免疫球蛋白制剂，主要成分由IgG、IgM组成，用于抗细菌感染及自身免疫疾病的治疗，由人血浆分离制备而成。由于人血浆中IgA含量很高，而且IgM和IgA的很多理化性质相似，二者的分离非常困难，导致富含IgM免疫球蛋白制剂中含有大量IgA，而大量IgA的存在会导致选择性IgA缺乏病患者过敏，严重的可致休克或死亡。

目前最常用的一种富含IgM的人免疫球蛋白制剂，其组分为12％IgM、12％IgA、76％IgG，其IgA的含量高达12％，与IgM含量相当，存在严重的安全隐患，副作用大。

急需提供一种IgA含量低的富含IgM的人免疫球蛋白制剂。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种新的IgM组分及其制备方法，还提供IgA含量低的富含IgM的人免疫球蛋白制剂及其制备方法。

IgM组分：是指从血浆中分离的富含IgM的组分。

本发明人免疫球蛋白的IgM组分，它含有如下重量百分比的成分：IgM：66.18～86.3％、IgA：4.6～12.46％、IgG：6.5～21.36％。

优选地，它含有如下重量百分比的成分：IgM：86.3％、IgA：4.6％、IgG：9.1％。

本发明制备前述人免疫球蛋白的IgM组分的方法，它包括如下步骤：

(1)溶解：将Cohn组分I+II+III或者Cohn组分II+III溶于注射用水中；

(2)辛酸沉淀：用辛酸或辛酸盐沉淀杂质，过滤，得滤液；

(3)第一步阴离子交换层析：将步骤(2)所得溶液调节pH至5.0-5.3，用阴离子交换层析纯化，收集流穿液；

(4)第二步阴离子交换层析：将步骤(3)所得流穿液调节pH至6.2-6.5，上阴离子交换层析柱，梯度洗脱：用含有100mM-150mM氯化钠的醋酸盐缓冲液洗脱，再用含有200mM-300mM氯化钠的醋酸盐缓冲液洗脱，收集洗脱液，即为IgM组分。

所述步骤(1)为：取Cohn组分I+II+III或者Cohn组分II+III，加入注射用水中，5℃搅拌至其溶解，调节pH为4.2，再在25℃水浴加热搅拌2h。

所述步骤(2)为：加入浓度为10mM-15mM的辛酸或辛酸盐，调节pH为5.0-5.2，于25℃水浴加热搅拌2h，8℃静置2h，过滤，得滤液。

所述步骤(2)中获得滤液后进行超滤浓缩，得浓缩液。

步骤(3)中，所述溶液的pH调节至5.3。

步骤(3)中，所述阴离子交换层析的填料为CaptoQ、GigacapQ或者UnosphereQ。

步骤(4)中，所述流穿液调节pH至6.2。

步骤(4)中，所述梯度洗脱是：用含有120mM或者150mM氯化钠的醋酸盐缓冲液洗脱，再用含有250mM或者300mM氯化钠的醋酸盐缓冲液洗脱，收集洗脱液。

采用本发明前述IgM组分与IgG组分，可以按照任意体积比配置成富含IgM的人免疫球蛋白制剂。

然而，富含IgM的人免疫球蛋白制剂的IgM理论值通常为12％，采用本发明IgM组分与IgG组分配置IgM理论值为12％的制剂时，实际得到的制剂，其IgM均会比12％略高，通常在12％～14之间，IgA均小于2％，剩余活性成分为IgG。

本发明具体实施例中，配置IgM理论值为12％的制剂，配置得到的富含IgM的人免疫球蛋白制剂的实际检测值为：IgM：12.3～13.8％、IgA：0.7～1.5％、IgG：85.5～86.2％。

因此，本发明富含IgM的人免疫球蛋白制剂，它是以如下重量百分比的组分为活性成分：IgM：大于12％、IgA：小于2％、IgG：84～88％，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。优选地，它是以如下重量百分比的组分为活性成分：IgM：12.3～13.8％、IgA：0.7～1.5％、IgG：85.5～86.2％，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。进一步优选地，它是以如下重量百分比的组分为活性成分：IgM：13.8％、IgA：0.7％、IgG：85.5％。

本发制备前述富含IgM的人免疫球蛋白制剂的方法，步骤如下：取前述IgM组分，加入IgG组分，混匀，透析，浓缩，除菌过滤，分装、冻干，即可。

所述IgG组分可以按照常规方法制备，也可以按照如下方法制备：