[发明专利]一种EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法在审
申请号: | 201510613646.1 | 申请日: | 2015-09-23 |
公开(公告)号: | CN105087720A | 公开(公告)日: | 2015-11-25 |
发明(设计)人: | 刘同军 | 申请(专利权)人: | 齐鲁工业大学 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/02 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 张宏松 |
地址: | 250353 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 edta 提高 木质 纤维素酶 转化 处理 方法 | ||
1.一种EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,包括步骤如下:
(1)将预处理后的木质纤维素原料与EDTA-2Na混合,然后加入去离子水搅拌均匀,于25~35℃条件下,保温搅拌反应1~3小时,反应后固液分离,固体用去离子水洗涤、干燥,制得预洗后的木质纤维素;
EDTA-2Na的添加量为0.001~0.003mol/g木质纤维素原料,离子水的加入量使木质纤维素原料的质量浓度达到5-20%(g/100ml);
(2)将预洗后的木质纤维素与NaOH,然后加入H2O2,搅拌均匀,制得混合反应液,混合反应液于28~35℃下,保温搅拌反应20~30小时,反应后固液分离,固体用去离子水洗涤、干燥,得处理后的木质纤维素;
所述混合反应液中,NaOH加量为0.025-0.15g/g预洗后的木质纤维素,H2O2加量为0.025~0.125g/g预洗后的木质纤维素。
2.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(1)中预处理后的木质纤维素原料为原料清除杂物,然后将木质素纤维素经风干、粉碎、过5mm孔径的筛子,得预处理后的木质纤维素原料。
3.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(1)中,木质纤维素原料选自玉米秸秆、麦秆、棉秆、稻草、油菜秆、甜高粱茎秆、甘蔗渣、木屑、废纸和/或柳枝稷。
4.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(1)中,EDTA-2Na的添加量为0.0025mol/g木质纤维素原料。
5.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(1)、步骤(2)搅拌反应的搅拌速度为100~200rpm。
6.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(2)中,NaOH加量为0.08-0.15g/g预洗后的木质纤维素。
7.根据权利要求1所述的EDTA预洗提高木质纤维素酶解转化率的处理方法,其特征在于,步骤(2)中,先将NaOH加入溶解量的去离子水中溶解后,再与预洗后的木质纤维素混合。
8.一种利用权利要求1处理后的木质纤维素生产木糖和葡萄糖的方法,包括如下:
a、向上述制得的处理后的木质纤维素中加入四环素、环己酰亚胺和柠檬酸缓冲液,四环素的添加量为使四环素终浓度达到35~45μg/mL,环己酰亚胺的添加量为使环己酰亚胺终浓度达到25~35μg/mL,柠檬酸缓冲液的的添加量为使柠檬酸缓冲液终浓度达到40~60ul/mL;
b、然后加入复合酶,酶蛋白总加量为40~60mg/g纤维素,在45~50℃条件下,搅拌反应65~75小时,经离心,取上清,制得木糖和葡萄糖溶液。
9.根据权利要求8所述的利用处理后的木质纤维素生产木糖和葡萄糖的方法,其特征在于,柠檬酸缓冲液的浓度为1mol/L,pH为4.8。
10.根据权利要求8所述的利用处理后的木质纤维素生产木糖和葡萄糖的方法,其特征在于,所述复合酶组分为β-葡萄糖苷酶和纤维素酶Accelerase1000,β-葡萄糖苷酶与纤维素酶Accelerase1000的蛋白质比为1:4;所述步骤b中搅拌速度为100~200rpm,离心为在4℃、12000rpm的条件下离心15min。
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