[发明专利]一种冷沉淀的预纯化方法在审
| 申请号： | 201510612830.4 | 申请日： | 2015-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN105175483A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 牟蕾;余伟;鲁涛;王黔川;李伟 | 申请（专利权）人： | 成都蓉生药业有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30;C07K14/755 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610000 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 沉淀 纯化 方法 | ||
1.一种冷沉淀的预纯化方法，其特征在于：它包括如下步骤：
(1)取冷沉淀，溶解；
(2)加入氢氧化铝凝胶干粉，氢氧化铝凝胶干粉的用量为冷沉淀的5～30％w/w，搅拌15～30min；
(3)再加入聚乙二醇至终浓度为3.0～4.0％w/v，混匀，调pH为6.0～6.5，继续搅拌15～60分钟；
(4)离心，离心的时间是10～30min，得上清，滤膜过滤，即可。
2.根据权利要求1所述的预纯化方法，其特征在于：步骤(1)中，冷沉淀溶解于20mmol/L、pH6.8的Tris溶液中。
3.根据权利要求2所述的预纯化方法，其特征在于：溶液的步骤是：在搅拌条件下，将冷沉淀加入Tris溶液中，其中，搅拌的频率是80～120rpm。
4.根据权利要求1～3任意一项所述方法，其特征在于：步骤(1)中，溶解时的温度不低于20℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述氢氧化铝凝胶干粉的用量为冷沉淀的5～15％w/w。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述搅拌时间为15～20分钟。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，聚乙二醇是通过加入聚乙二醇母液的方式加入，其中，聚乙二醇母液中含有30％w/v的聚乙二醇和0.21％w/v的枸橼酸钠，且其pH为6.3。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述搅拌时间为20～40分钟。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(3)中，所述搅拌的频率是80～120rpm。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中，所述离心的时间是15～20分钟。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中，离心机的转速为3500～4200rpm。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)～(4)期间，控制温度为20～37℃。
13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述温度为25～35℃。
14.权利要求1～13任意一项所述的方法制备的预纯化液。
15.权利要求14所述预纯化液在制备人凝血因子VIII制剂中的用途。
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