[发明专利]CsRIP1基因及其表达和应用

权利要求书

1.CsRIP1基因，其特征在于具有序列表SEQIDNO:1所示的碱基序列，并表达具有序列表SEQIDNO:2所示氨基酸序列的重组蛋白。

2.用于表达如权利要求1所述重组蛋白的重组质粒，其特征在于通过如下方法构建：1)以CsRIP-F1、CsRIP-R1作为上下游引物，对CsRIP1基因进行PCR扩增；2)步骤1)所得PCR产物用SacI、XbaI进行双酶切处理，pCzn1质粒用SacI、XbaI进行双酶切处理；3)取双酶切后的CsRIP1基因扩增片段和双酶切后的pCzn1质粒，在T4DNA连接酶作用下获得pCzn1-A表达载体；4)将所得表达载体加入到感受态细菌中，在含有Amp的LB平板中倒置培养过夜，完成重组质粒构建。

3.如权利要求1所述重组蛋白的表达方法，其特征在于包括如下步骤：1)权利要求2所得重组质粒菌株接种于含Amp的LB培养液的试管中振摇过夜，培养至菌体OD600为0.6-0.8；2)向培养物中加入IPTG至终浓度为0.5mM，诱导重组蛋白表达。

4.如权利要求3所述表达方法，其特征在于还包括对重组蛋白表达产物进行SDS-PAGE分析的步骤。

5.如权利要求3所述表达方法，其特征在于还包括对重组蛋白表达产物通过Ni柱亲和纯化的步骤。

6.如权利要求1所述重组蛋白在抑制体外蛋白合成中的应用，包括将重组蛋白加入到蛋白质的体外翻译系统中的步骤。