[发明专利]一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法有效
申请号: | 201510585475.6 | 申请日: | 2015-09-15 |
公开(公告)号: | CN105092765A | 公开(公告)日: | 2015-11-25 |
发明(设计)人: | 唐庆九;王金艳;冯娜;王晨光;张劲松;张忠;刘艳芳;周帅;唐传红 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院;上海百信生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 201403 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 灵芝 孢子 原料 有效成分 检测 方法 | ||
1.一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
麦角硫因的高效液相色谱检测。
2.一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
麦角硫因的高效液相色谱检测、和、核苷类成分的高效液相色谱检测。
3.根据权利要求1-2的一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
A灵芝孢子粉的预处理步骤,将灵芝孢子粉加入溶剂浸提,得到浸提液,过滤,得到滤液;
B高效液相色谱检测步骤,对待测样品的滤液进行高效液相色谱分析;
C指标成分是麦角硫因、和、或、核苷类成分。
4.根据权利要求1-2的一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
A灵芝孢子粉的预处理步骤,将灵芝孢子粉加入溶剂浸提,得到浸提液,过滤,得到滤液;
B高效液相色谱检测步骤,对待测样品的滤液进行高效液相色谱分析;
C指标成分是麦角硫因;
色谱柱为复合柱;流动相溶液成分甲醇、乙腈、甲醇-水、乙腈-水、水中的一种或多种,最优选纯水;
流动相的pH范围为2.0-9.0,优选6.0-7.5;
用于调节pH的酸或盐选自乙酸、乙酸钠、硼酸、甲酸、丁酸、乙二酸中的一种或多种,优选乙酸;
检测波长为250-260nm,优选257-260nm,最优选257nm;
柱温为15-40℃,优选25-30℃,最优选30℃;
流动相的流速为0.2-1.0mL/min,优选0.4-0.6mL/min,最优选0.6mL/min;
色谱图的记录时间为30min以下;麦角硫因的出峰时间为15-20min。
5.根据权利要求1-2的一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
A灵芝孢子粉的预处理步骤,将灵芝孢子粉加入溶剂浸提,得到浸提液,过滤,得到滤液;
B高效液相色谱检测步骤,对待测样品的滤液进行高效液相色谱分析;
C指标成分是核苷类成分;
核苷类成分选自胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、脱氧鸟苷、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷、虫草素中的多种;
色谱柱为反相碳十八柱;流动相溶液成分甲醇、乙腈、甲醇-水、乙腈-水、水中的一种或多种,最优选纯甲醇-水;
流动相的pH范围为6.0-8.0,优选6.5-7.5,最优7.0;
检测波长为250-260nm,优选257-260nm,最优选259nm;
柱温为15-40℃,优选25-30℃,最优选30℃;
流动相的流速为0.2-1.0mL/min,优选0.4-0.6mL/min,最优选0.6mL/min。
6.根据权利要求4的一种灵芝孢子粉原料有效成分的检测方法,包括以下步骤:
甲醇A-水B:
0→10min,0%A;
10→15min,A:0%→5%;
15→30min,A:5%→20%;
30→35min,A:20%→25%;
35→36min,A:25%→0%;
36→45min,0%A。
7.如权利要求1-2所述的检测方法,其特征在于:
在所述的灵芝孢子粉的预处理步骤中,浸提方法包括水浴浸提、磁力搅拌浸提、超声浸提。
8.如权利要求1-2所述的方法,其特征在于:
在所述的灵芝孢子粉的预处理步骤中,浸提方法包括一次性浸提或反复浸提,浸提温度为20-100℃,浸提总时间为30-120min;
过滤步骤中选择孔径0.1-0.45μm的水相微孔滤膜,优选0.22μm孔径的水相微孔滤膜。
9.如权利要求1所述的检测方法,在所述的灵芝孢子粉的预处理步骤中,超声浸提过程中超声功率600w,频率40kHz。
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