[发明专利]一种多西紫杉醇纳米载药颗粒、其制备方法和应用

权利要求书

1.一种多西紫杉醇纳米载药颗粒，其特征在于：其包括纳米颗粒、包裹在所述的纳米颗粒内的多西紫杉醇、通过共价键修饰于所述的纳米颗粒表面的巯基化的EGF1蛋白，所述的纳米颗粒是由马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物形成，所述的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物中的马来酰亚胺基与所述的纳米颗粒表面的EGF1蛋白的巯基通过共价键结合；所述的多西紫杉醇纳米载药颗粒的制备方法包括依次进行的如下步骤：

步骤（1）、采用挥发性有机溶剂将所述的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的多西紫杉醇溶解，得到有机相，而后在超声乳化仪超声的条件下将所述的有机相分散至水相中，得到水包油型乳液，搅拌使所述的有机溶剂缓慢挥发，得到纳米颗粒，离心后制得包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒；所述的挥发性有机溶剂为二氯甲烷，所述的水相为质量浓度为0.5wt%~2wt%的聚乙烯醇水溶液，所述有机相与水相的体积之比为15~25:1；所述的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的多西紫杉醇的投料质量比为40~60：1；

步骤（2）、将步骤（1）制得的所述的包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒加入到磷酸盐缓冲液中，混匀后，加入所述的巯基化的EGF1蛋白，在10~35℃下避光、充氮气的情况下磁力搅拌10~16小时，然后在2~6℃、13500~14500rpm的条件离心，除去上清液后，加入磷酸盐缓冲液混匀，经Sepharose CL-4B 柱，除去未结合的游离蛋白，收集洗脱液，所述的洗脱液经冷冻干燥得到所述的多西紫杉醇纳米载药颗粒；所述的包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒中的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的巯基化的EGF1蛋白中的巯基的投料摩尔比为1:0.5~1.5；所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.008~0.012mol/L；

步骤（1）中还包括在离心操作后，采用超纯水将包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒洗涤干净、冻干的步骤。

2.一种如权利要求1所述的多西紫杉醇纳米载药颗粒的制备方法，其特征在于：包括依次进行的如下步骤：

步骤（1）、采用挥发性有机溶剂将所述的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的多西紫杉醇溶解，得到有机相，而后在超声乳化仪超声的条件下将所述的有机相分散至水相中，得到水包油型乳液，搅拌使所述的有机溶剂挥发，得到纳米颗粒，离心后制得包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒；所述的挥发性有机溶剂为二氯甲烷，所述的水相为质量浓度为0.5wt%~2wt%的聚乙烯醇水溶液，所述有机相与水相的体积之比为15~25:1；所述的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的多西紫杉醇的投料质量比为40~60：1；

步骤（2）、将步骤（1）制得的所述的包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒加入到磷酸盐缓冲液中，混匀后，加入所述的巯基化的EGF1蛋白，在10~35℃下避光、充氮气的情况下磁力搅拌10~16小时，然后在2~6℃、13500~14500rpm的条件离心，除去上清液后，加入磷酸盐缓冲液混匀，经Sepharose CL-4B 柱，除去未结合的游离蛋白，收集洗脱液，所述的洗脱液经冷冻干燥得到所述的多西紫杉醇纳米载药颗粒；所述的包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒中的马来酰亚胺-聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙醇酸聚合物与所述的巯基化的EGF1蛋白中的巯基的投料摩尔比为1:0.5~1.5；所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.008~0.012mol/L；

步骤（1）中还包括在离心操作后，采用超纯水将包裹有多西紫杉醇的纳米颗粒洗涤干净、冻干的步骤。

3.一种如权利要求1所述的多西紫杉醇纳米载药颗粒在制备治疗过度表达组织因子的肿瘤的药物中的应用。