[发明专利]一种从芸香科植物的籽或果实中提取吴茱萸内酯的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物中有效成分利用领域，主要是涉及从芸香科植物的籽或果实中大量制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)的方法。

技术背景

吴茱萸内酯又被称为柠檬苦素(Limonoids)，主要存在于芸香科(Rutaceae)植物的籽或果实中。如在吴茱萸的果实、石虎的果实、疏毛吴茱萸的果实、柠檬的籽、桔子的籽、柑橘的籽、橙子的籽或柚子的籽等中都有较高含量的吴茱萸内酯(柠檬苦素)。吴茱萸内酯(柠檬苦素)具有较强的生理活性，例如：抗氧化、抗炎、抗真菌、镇痛、抗肿瘤、抗病毒等活性，所以吴茱萸内酯(柠檬苦素)是一类具有非常高的开发价值的活性成分。

本发明提出了一种新的高效分离纯化吴茱萸内酯(柠檬苦素)的方法，该方法所用原料来源广泛、易得，制备方法简便易行，非常易于吴茱萸内酯(柠檬苦素)的大规模工业化生产。

在文献或专利中已经多种制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)的方法报道，如中国专利“申请号200910115318.3、201110081655.2、200810046164.2、200810037312.4、201210153841.7、201110004630.2、200910104500.9、201010300601.6和200810204440.3”都有采用柱层析或大孔树脂分离的手段来制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)；中国专利“申请号201210033504.4”采用多次超临界CO₂提取和结晶的方法来制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)；中国专利“申请号201410555943.0”采用反复洗涤、结晶和活性炭脱色的方法来制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)；中国专利“申请号00106285.9”采用反复脱脂和结晶的方法来制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)；中国专利“申请号201410259115.2”采用榨汁法及盐析的方法提取和制备吴茱萸内酯(柠檬苦素)。本专利以常规溶剂为提取溶剂，利用碱溶酸沉的原理来分离纯化吴茱萸内酯(柠檬苦素)，简单有效更易工业化。

发明内容

本发明主要是以芸香科植物的籽或果实为原料，提供一种吴茱萸内酯(柠檬苦素)的制备方法。它主要是先通过溶剂对原料进行提取，回收溶剂得到的浸膏；浸膏用石油醚进行脱脂；脱脂后的浸膏用稀酸溶液洗涤；洗涤后浸膏用碱溶液充分溶解，然后用酸调节pH至酸性，析出固体；取固体，干燥后用氯仿溶解，取氯仿溶液，回收氯仿得固体；所得固体用少量乙醇等溶剂洗涤；洗涤后的固体进行结晶和重结晶，就可得到高纯度的吴茱萸内酯(柠檬苦素)晶体。

芸香科植物的籽或果实中含有大量的吴茱萸内酯(柠檬苦素)可以作为提取原料，如柠檬籽、柑橘籽、桔子籽、橙子籽或柚子籽、吴茱萸果实、或石虎果实等；优选为桔子籽、柠檬籽。

本发明从芸香科植物的籽或果实中提取吴茱萸内酯的方法方法，具体步骤主要如下：

将芸香科植物的籽或果实作为原料；

取经干燥、粉碎的原料粉末，按液固比mL/g1/1-50/1加入溶剂，提取1-5次，每次1-4h，合并提取液并回收溶剂得到浸膏；所述溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯的一种或几种混合物、或甲醇、乙醇、丙酮的50％～95％体积比浓度水溶液；

将上述浸膏按液固比mL/g1/1-100/1用石油醚脱脂1-5次；然后再按液固比mL/g1/1-100/1用浓度为1-10％的稀盐酸、硫酸、硝酸或磷酸溶液浸泡洗涤1-48h，反复进行1-6次；

将上述经洗涤所得的固体按液固比mL/g1/1-100/1加入到浓度为1-20％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液中，充分溶解1-48h，过滤或离心得碱溶液；取碱溶液加盐酸、硫酸、硝酸或磷酸调节pH至1-7，析出固体，过滤或离心，所得固体干燥，得吴茱萸内酯粗产品；

将所得茱萸内酯粗产品按液固比mL/g1/1-200/1用氯仿或二氯甲烷溶解，过滤或离心，取溶液，回收溶剂得到固体；所得固体按液固比mL/g1/1-50/1用甲醇、乙醇、氯仿或丙酮洗涤1-6次，干燥；

将干燥所得固体，用二氯甲烷、氯仿或丙酮进行溶解并结晶，然后用二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙醇、异丙醇一种或几种的混合溶剂重结晶，即可到高纯度吴茱萸内酯晶体。

为达到更好的提取效果：

提取过程是在超声波或微波辅助下进行提取，或加热回流提取或常温浸取。

所用石油醚沸程为60-90℃。

本发明的有益效果：从原料中提取吴茱萸内酯(柠檬苦素)的提取率可达90％以上，且提取纯度可达99％，制作工艺简单易操作，且成本低，适用于工业化大规模生产。

具体实施方法：

实施例1：