[发明专利]用于分型检测水痘带状疱疹病毒的试剂盒及其生产方法与应用

权利要求书

1.用于分型检测水痘带状疱疹病毒的试剂盒，其特征在于，包括具有如下核苷酸序列和化学结构的clade1-5型水痘带状疱疹病毒对应的特异性引物及特异性探针：

clade1-上游引物：5’-Biotin-CACGGAACATGAATGTAGGA-3’

clade1-下游引物：5’-Biotin-ATCCTTTTCGTCTGGCTTA-3’

clade1-探针：5’-NH2-TTTTTTTTTTCGTACAAAATGCGGTGGGT-3’

clade2-上游引物：5’-Biotin-CGTCTACCCGACCTTCATAC-3’

clade2-下游引物：5’-Biotin-CTTGTGGCATACGTTCGT-3’

clade2-探针：5’-NH2-TTTTTTTTTTGAAAAGCGTTCTTGTCTCC-3’

clade3-上游引物：5’-Biotin-CACTGTCAGACACACTTGGGA-3’

clade3-下游引物：5’-Biotin-TATAAGGGGACGTTGGAACT-3’

clade3-探针：5’-NH2-TTTTTTTTTTTTCATCGGTGCTATTGGG-3’

clade4-上游引物：5’-Biotin-CGTTATAGCAGGGGTCTCC-3’

clade4-下游引物：5’-Biotin-TTTATTGGCACGTTGTCG-3’

clade4-探针：5’-NH2-TTTTTTTTTTCCGTGACAGAAACATCAACC-3’

clade5-上游引物：5’-Biotin-TTCGGTCCACTAGCGTTG-3’

clade5-下游引物：5’-Biotin-GCTTGATGGTTATGGCAGTA-3’

clade5-探针：5’-NH2-TTTTTTTTTTGCCCTACAAAGACATTCCG-3’。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括用于进行PCR的试剂、荧光微球、用于将探针与荧光微球进行偶联制备微球杂交液的试剂、和/或用于将PCR产物与微球杂交液进行杂交的试剂。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述用于进行PCR的试剂包括：PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶、双蒸水；

所述荧光微球为Luminex羧基荧光微球；

所述用于将探针与荧光微球进行偶联制备微球杂交液的试剂包括：MES缓冲液、EDC溶液、Tween 20、SDS、TE缓冲液、TMAC杂交缓冲液， 其中 MES 缓冲液的 pH 值为 4.5 ；

所述用于将PCR产物与微球杂交液进行杂交的试剂包括：SA-PE；

所述TMAC杂交缓冲液包括：5mol/L TMAC、1mol/L Tris-HCl、20％Sarkosyl、0.5mol/LEDTA，其中 Tris-HCl 的 pH 值为 8.0 。

4.一种用于分型检测水痘带状疱疹病毒的试剂盒的制备方法，其特征在于，组装试剂盒的试剂中包括权利要求1所述的clade1-5型水痘带状疱疹病毒对应的特异性引物及特异性探针。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，组装试剂盒的试剂中还包括用于进行PCR的试剂、荧光微球、用于将探针与荧光微球进行偶联制备微球杂交液的试剂、和/或用于将PCR产物与微球杂交液进行杂交的试剂。