[发明专利]一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺

权利要求书

1.一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺，针对糖化酶生产菌黑曲霉GB0506发酵前期菌体生长时间长并存在一个特殊的酶活快速增长期的特点建立的，其特征在于：在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期：即在采用酶活为1200 -1400U/mL的种子培养液按10%接种量接种到发酵培养基的条件下，当发酵进行到118-120 小时的时候；将发酵液平均分配到3个发酵罐中，添加新鲜发酵培养基继续发酵40-42小时至发酵终点；

采用发酵罐组合使用的方法，组合使用5个发酵罐提高发酵罐使用效率，具体工艺如下：

在黑曲霉GB0506糖化酶发酵中，组合使用5个发酵罐，编号为A~E，按每周一个循环进行发酵；其中A、B、C三个发酵罐轮流作为第一罐发酵，即一级发酵，按48小时一罐间隔接入种子培养液，D、E两个发酵罐固定用作发酵液分割后发酵，即二级发酵；

一个一级发酵罐发酵至糖化酶酶活线性增长末期：即发酵进行到118-120小时的时候，将发酵液各1/3分配到已经准备好新鲜发酵培养基的D、E二级发酵罐中，再从联消器储罐分配相当于2/3发酵液体积的新鲜发酵培养基至该一级发酵罐中；

三个发酵罐一起进行二级发酵，再经40-42小时发酵后结束发酵；结束发酵后安排4-8小时间隔，用于放罐、发酵罐清洗、培养基配制及灭菌工作；该一级发酵罐接种新的种子培养液用于下一轮发酵；D、E发酵罐再次与另一个一级发酵罐一起进行发酵液分割及二级发酵；

以一周为一个循环的方式安排发酵，采用如下方式进行安排：

A发酵罐在每周三早晨接种种子培养液，发酵至下一周的周一早晨，与D、E罐进行发酵液分割并进行二级发酵；40-42小时后，A罐与D、E罐一起放罐；周三早晨A罐再次接入种子培养液，培养至下一周的周一再次用于下一循环的发酵液分割及二级发酵；B发酵罐在每周五早晨接种种子培养液，发酵至下一周的周三早晨，与D、E罐进行发酵液分割并进行二级发酵，于周五凌晨B罐与D、E罐一起放罐；于周五早晨再次接入种子培养液，发酵至下一周的周三再次用于下一循环的发酵液分割及二级发酵；C发酵罐在周日早晨接种种子培养液，发酵至下一周的周五早晨，与D、E罐进行发酵液分割并进行二级发酵，于周日凌晨C罐与D、E罐一起放罐；于周日早晨再次接种种子培养液，发酵至下一周的周五再次用于下一循环的发酵液分割及二级发酵。