[发明专利]一种促进人角质细胞表达炎症因子IL-1α的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种促进人角质细胞表达炎症因子IL-1α的方法。

背景技术

炎症因子是一类小分子多肽和糖蛋白，具有调节和介导免疫反应、炎症反应的作用，包括白介素类、干扰素类、肿瘤坏死因子类、生长因子类以及趋化因子类。细胞受到刺激后产生大量的炎症因子，直接或间接影响淋巴细胞或周围细胞，在免疫调节、炎症反应、细胞凋亡中起重要作用。

表皮细胞或成纤维细胞释放炎症因子IL-1α，又叫IL-1A或IL1F1，它与其他8个白介素家族基因均位于人类第2号染色体上，它可以结合细胞表面受体，发挥免疫炎症调节，促进细胞分化等生物学作用。

角质细胞分泌炎症因子白介素1(IL-1α)一方面促进成纤维细胞分泌IL-6，引起成纤维细胞大量基因表达发生变化，另一方面促进中性粒细胞粘附到内皮细胞上，从而刺激机体局部发生炎症反应。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是促进人角质细胞表达炎症因子IL-1α。

为解决上述问题，本发明首先提供了一种促进离体的人角质细胞表达炎症因子IL-1α的方法，可包括如下步骤a2)：用SDS处理离体的人角质细胞。

上述方法中，所述步骤a2)中，可用浓度为0.3-0.4μg/ml的SDS处理所述离体的人角质细胞。

上述方法中，所述步骤a2)中，具体可用浓度为0.357μg/ml的SDS处理所述离体的人角质细胞。

上述方法中，所述步骤a2)中，用SDS处理离体的人角质细胞的条件参数可为：35-39℃，5h-7h。

上述方法中，所述用SDS处理离体的人角质细胞的条件参数具体可为37℃和6h。

上述方法中，还包括如下步骤a1)：将离体的人角质细胞的细胞悬液接种至细胞培养板，培养；在进行所述步骤a2)前先进行所述步骤a1)。

上述方法中，所述步骤a2)可为：完成所述步骤a1)后，取所述细胞培养板，加入SDS溶液并培养。

上述方法中，所述步骤a1)中，所述细胞悬液中人角质细胞的浓度可为18000-20000个/cm²。

上述方法中，所述细胞悬液中人角质细胞的浓度具体可为19000个/cm²。

上述方法中，所述步骤a1)中，所述培养的条件可为：35-39℃，18h-26h。

上述方法中，所述步骤a1)中，所述培养的条件具体可为：37℃和24h。

上述方法中，所述步骤a1)中，所述细胞悬液的接种量可为100μL/孔。

上述任一所述炎症因子IL-1α的基因序列可如序列表中序列1所示。

上述任一所述SDS溶液可为用DMEM培养基溶解SDS获得。

上述任一所述细胞悬液的制备方法具体如下：用0.25％胰蛋白酶消化离体的人角质细胞，然后用含10％胎牛血清(体积百分比)的DMEM培养基重悬并稀释。

上述任一所述DMEM培养基的制备方法具体如下：将高糖DMEM固体培养基(Gibco公司产品)13.5g和NaHCO₃3.7g依次溶于水，pH调至7.2-7.4，然后定容至1L。

上述任一所述人角质细胞可为人表皮角质细胞。

实验证明，本发明提供的方法可以显著促进人表皮角质细胞中炎症因子IL-1α的表达，从而可以用于筛选治疗炎症的药物。

附图说明

图1为MTT法测定不同浓度的SDS溶液处理人表皮角质细胞的存活率。

图2为炎症因子IL-1α在SDS溶液不同处理时间下的表达量。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中的定量实验，如无特殊说明均设置三次重复，结果取平均值。

人表皮角质细胞为北京富隆康泰生物技术有限公司产品；SDS为sigma公司产品，产品目录号为L5750；胎牛血清为Hyclone公司产品，产品目录号为SH30084.03；0.25％胰蛋白酶为Hyclone公司产品，产品目录号为SH30042.01；DMSO为sigma公司产品，产品目录号为D2650。