[发明专利]红木中降香黄檀的分子鉴定方法及其引物和探针

说明书

本发明公开了一种红木中降香黄檀的鉴定方法，所述方法包括引物、探针和分子水平的PCR检测方法，所述引物和探针具有降香黄檀的专属特异性。本发明检测样本量少，以木材特有的DNA信息为依据，能快速、准确、客观地获得降香黄檀的种属鉴定结果，避免了传统鉴定方法主观性强以及必须建立在所检木材有完整易辨识的形态结构基础上的缺陷。因此本发明可用于农林、工商、检验检疫等相关部门进行执法检测，同时也可以用于第三方检测机构的消费者维权鉴定之用。对规范市场，保护消费者权益，促进物种资源的保护和利用具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及木材材种鉴定的分子生物学检测领域，具体地说涉及对降香黄檀的分子鉴定方法及其所使用的引物和探针。

背景技术

近年来，由于红木家具受到越来越多消费者的喜爱，促进了红木家具制造业的繁荣，因此红木木材的进口量也随之逐年增加。但是，长期以来由于受利益驱使，红木市场良莠不齐，掺假造假情况突出：一方面用较次的红木冒充较好的红木，另一方面用非红木冒充红木等。

降香黄檀（Dalbergia odorifera T.Chen）是红木国家标准(红木GB/T 18107-2000)规定的33种木材品种之一，属豆科蝶形花亚科黄檀属，是海南特有濒危树种，为国家二级保护植物。降香黄檀以树干、根的干燥心材入药，具行气活血、止痢、止血功效，为国家药典收载的名贵南药之一。降香黄檀心材极耐腐，切面光，且香气经久不灭，被广泛用于高档家具、工艺品等。

正是由于降香黄檀的珍惜名贵，它与普通木材在价格上存在巨大的差额，导致不法分子将一些容易混淆和不易区分的树种和木材制品冒充降香黄檀进行销售，极大地扰乱了市场秩序，给消费者带来了巨大的经济损失。降香黄檀也常冒充普通木材进行运输和走私，对正常进出口贸易照成很大影响。

传统的红木鉴定识别方法是利用人工经验进行识别，主要通过对木材截面进行人工观察的方式完成。一般情况下依赖肉眼和放大镜进行宏观识别，而微观识别则需要使用光学显微镜观察其内部的解剖结构特征，也就是观察构成木材的各类细胞与组织的形态及排列特征，该方法涉及的识别特征较多，鉴定相对准确，但对于鉴定工作者的要求很高，要对此做出准确的鉴定，必须具有丰富的实践经验。近年来研究工作者开发了基于数字图像处理的木材图像识别技术，大大提高了木材识别的准确性,推动了木材识别技术的发展。但是，无论是基于识别者经验的传统识别技术还是基于计算机图像检索的识别技术，都没有脱离木材本身的形态结构及特征，鉴定识别工作都必须建立在所检木材有完整易辨识的形态结构的基础上，这就为木材识别工作带来了一定的局限性，同时，相近种属木材易出现材质结构的相似，为木材识别的准确性带来困难。

目前对降香黄檀的鉴定依然采用传统的木材鉴定手段，即解剖切片观察木材的构造以及形态特征从而得出判定结果。因此建立起以DNA基因信息为基础的分子鉴定方法，实现降香黄檀的简单、快速、准确、客观的鉴定是目前急需解决的问题。

发明内容

本发明提供一种用于降香黄檀的分子鉴定方法的引物和探针，所述引物和探针序列包括：

JXHT Primer-F：5'-ACGGTGGTTGAGCGTGTT-3'

JXHT Primer-R：5'-CTAGGGGAATCCTCGTTAGTTT-3'

JXHT Primer Probe ：5'-VIC-TCATGAGGGCGGCCT-MGB-3'。

进一步地，所述引物和探针的PCR反应条件为：95℃，2min；95℃ 15s，55℃ 34s，共40个循环。

进一步地，所述引物和探针的使用浓度比为：JXHT Primer-F:JXHT Primer-R:JXHT Primer Probe=1:1:2。

本发明还提供了一种用于降香黄檀的分子鉴定的方法，包括如下步骤：