[发明专利]红木中降香黄檀的分子鉴定方法及其引物和探针有效
| 申请号： | 201510520219.9 | 申请日： | 2015-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN105087798B | 公开（公告）日： | 2018-07-20 |
| 发明（设计）人： | 张明哲;徐莉莉;尹文秀;陈吴健;吴志毅;林晓佳 | 申请（专利权）人： | 浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 黎双华 |
| 地址： | 310002 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 红木 降香 黄檀 分子 鉴定 方法 及其 引物 探针 | ||
1.用于降香黄檀的分子鉴定方法的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针序列包括：
JXHT Primer-F：5'-ACGGTGGTTGAGCGTGTT-3'
JXHT Primer-R：5'-CTAGGGGAATCCTCGTTAGTTT-3'
JXHT Primer Probe：5'-VIC-TCATGAGGGCGGCCT-MGB-3'。
2.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，还包括判断木材样本中的DNA是否被成功提取的引物和探针，分别是：
tRNALeu-F：5'-CGAAATCGGTAGACGCTACG-3'
tRNALeu-R：5'-TTCCATTGAGTCTCTGCACCT-3'
tRNALeu Probe：5'-FAM-GCAATCCTGAGCCAAATCC-TAMRA-3'。
3.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针的使用浓度比为：JXHT Primer-F:JXHT Primer-R:JXHT Primer Probe＝1:1:2。
4.用于降香黄檀的分子鉴定方法，包括如下步骤：
(1)木材样本的预处理；
(2)提取经(1)处理后的木材样本中的DNA；
(3)利用引物JXHT Primer-F和JXHT Primer-R，以及探针JXHT Primer Probe对(2)中提取的DNA进行荧光PCR扩增；
(4)木材种类的确定；
其特征在于，所述引物和探针序列包括：
JXHT Primer-F：5'-ACGGTGGTTGAGCGTGTT-3'
JXHT Primer-R：5'-CTAGGGGAATCCTCGTTAGTTT-3'
JXHT Primer Probe：5'-VIC-TCATGAGGGCGGCCT-MGB-3'。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)之间还包括利用植物內源基因tRNALeu判断木材样本中的DNA是否被成功提取的步骤，所述步骤包括的引物和探针分别是：
tRNALeu-F：5'-CGAAATCGGTAGACGCTACG-3'
tRNALeu-R：5'-TTCCATTGAGTCTCTGCACCT-3'
tRNALeu Probe：5'-FAM-GCAATCCTGAGCCAAATCC-TAMRA-3'。
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