[发明专利]三萜皂苷类化合物及其制备方法和用途

权利要求书

1.三萜皂苷类化合物，其特征在于，所述三萜皂苷类化合物的结构式为：

所述三萜皂苷类化合物为：6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-达玛-17β(H)-20(22)(E)–烯- 3β,6α,12β,24S,25-五醇。

2.如权利要求1所述的三萜皂苷类化合物，其特征在于，所述的三萜皂苷类化合物是 从三七转化产物中提取得到的。

3.一种如权利要求1所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，具体步骤如 下：

步骤一：三七转化产物的制备：

A种子液制备：

取灵芝种子培养液液体培养基于压力蒸汽灭菌器中于121℃灭菌处理30分钟，冷却后 在无菌操作台中接入斜面菌种，于恒温振荡培养箱中于27～29℃，160转/分钟下培养，得澄 清星芒状菌球，即得种子液备用；

B转化产物的制备：

取三七药材粉末，加入生长因子和水，混匀，密封并灭菌，于室温下冷却，在无菌操作 台内接入所述步骤A制备的所述种子液，避光培养，至容器底部布满菌丝体为止，取出干 燥，即得三七转化产物；

步骤二：提取：

取所述步骤B制备的所述三七转化产物，加入4～8倍重量份的70％的乙醇，回流提取 3～5次，每次1～3小时，过滤并合并提取液，压缩得稠膏；将所述稠膏加水分散并依次用等 体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇溶液萃取6～8次，后对萃取液分别减压干燥，得石 油醚部分、乙酸乙酯部分和水饱和正丁醇部分；

步骤三：分离纯化：

取所述步骤二制备的所述乙酸乙酯部分上硅胶柱色谱，以体积比100:0～0:100的二氯甲 烷-甲醇混合溶剂洗脱，薄层色谱检识，收集二氯甲烷-甲醇＝100:10部分洗脱液，合并含所 述三萜皂苷类化合物所述流分为157～165的洗脱液，回收溶剂至干，所得物再经反相RP- C18柱层析，以体积比100:50的甲醇-水混合溶剂洗脱，减压回收溶剂至干，得到含有所述 三萜皂苷类化合物粗品，再经半制备型高效液相色谱分离纯化，用58％甲醇-水洗脱，即甲 醇与水的质量比为58:42，得到所述三萜皂苷类化合物纯品。

4.如权利要求3所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述灵芝种子培 养液液体培养基包括如下重量百分比的组分：葡萄糖为1％～4％，蛋白胨为0.2％～1％，酵母 粉为0.1％～0.3％，磷酸二氢钾为0.1％～0.3％，硫酸镁为0.1％，水为95％～99％。

5.如权利要求4所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述灵芝种子培 养液液体培养基包括如下重量百分比的组分：葡萄糖为2％，蛋白胨为0.5％，酵母粉为 0.2％，磷酸二氢钾为0.1％，硫酸镁为0.1％，水为97.1％。

6.如权利要求5所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤B中： 所述三七药材粉末过10目筛；所述生长因子为：碳酸钙，加入的所述碳酸钙的重量为所述 三七药材粉末重量的0.01倍量，加水量为所述三七药材粉末重量的1.5倍；所述混均后的三 七药材粉末中含水量为60％。

7.如权利要求6所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤B中： 灭菌条件为：于立式压力蒸汽灭菌器中灭菌处理1小时；避光培养条件为：29℃～31℃， 65％RH。

8.如权利要求7所述的三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤B中， 灵芝种子液与所述三七药材的重量体比为2:1。

9.如权利要求1所述的三萜类化合物的用途，其特征在于，所述三萜皂苷类化合物在 制备抗肿瘤药物中的应用。

10.一种抗肿瘤药物，其特征在于，包含权利要求1所述的三萜皂苷类化合物。