[发明专利]一种总蟾毒内脂PLGA纳米微球冻干制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及冻干制剂，尤其涉及总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，本发明还涉及所述总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂的制备方法，属于PLGA纳米微球冻干制剂及其制备领域。

背景技术

取自中药中华大蟾蜍皮部的华蟾素能解毒，消肿，止痛。适用于中、晚期肿瘤，慢性乙型肝炎等的治疗。但经研究发现，华蟾素注射液中具抗肿瘤活性的总蟾毒内酯类(蟾毒配基类、蟾蜍毒素类)成分含量极低，主要为水溶性吲哚类生物碱(如5-羟色胺、蟾蜍色胺、蟾蜍特尼、蟾蜍硫黄等)类、氨基酸等成分，而大量的内酯类有效成分损失殆尽，目前尚未有生物碱成分有抗肿瘤活性的研究报道，且临床研究认为华蟾素不良反应心律失常、局部静脉刺激反应、皮肤反应、哮喘、超敏反应等均为水溶性吲哚类生物碱成分的药理作用所致。综上，华蟾素存在有效成分含量低，杂质多，质量及临床疗效不稳定、毒副作用大等严重缺陷，因此，富集发挥抗肿瘤活性的内酯类成分、去除生物碱及其他杂质成了我们研究的重心。

对华蟾素提取液进行分离纯化，得华蟾素有效部位——总蟾毒内酯，主要含有蟾毒配基(resibufogenin)、华蟾酥毒基(cinobufagin)、蟾毒灵(bufalin)、蟾毒它灵(Bufotalin)、日蟾毒它灵-3-半辛二酸酯(Gamabufotalin-3-hydrogenSuberate)、蟾蜍灵-3-丁二酰精氨酸酯、华蟾毒精-3-丁二酰精氨酸酯等内酯类成分。针对市场上中药注射液普遍存在的诸多问题，开发出工艺先进、质量稳定、疗效高、毒副作用少的中药注射制剂是十分必要的，鉴于总蟾毒内酯具有独特的技术优势，我们对华蟾素注射液进行二次深度开发，研制了总蟾毒内酯冻干制剂——“注射用华蟾内酯”。

PLGA具有良好的生物相容性、缓释特性、可降解性，已被广泛用于微球的制备，该微球体系具有保护药物免遭破坏，靶向药物到某些特殊组织，延缓/控制药物释放，延长药物作用时间，降低药物毒性和刺激性等优点。FDA批准用作药物载体的材料，使其成为一种正在被广泛应用的抗肿瘤药物的载体，较传统化疗制剂相比具有抗肿瘤新生血管生成等多方面优势。并且我们可以根据临床需求具体调整合适的粒径，利用静脉注射、间质给药、口服给药等多种方式。

纳米微球(nanospheres,NSs)是20世纪70年代兴起的一种新型的给药系统，它是利用适宜的天然或者合成的高分子材料将载体包裹或者药物吸附而形成的球形或者是类球形的微粒。纳米微球制剂的主要优点：(1)解决口服水解药物的给药途径。(2)选择适宜的载体材料并优化制备工艺，可实现药物在体内几周或几个月缓慢释放，减少或者给药次数。(3)实现靶向给药，如微球修饰，药物作用于靶部位。(4)提高难溶性药物的溶解度和溶出度，发挥缓释作用。(5)纳米微球以一定速率释放，以维持有效血药浓度微球可以包载很多种药物，如化学类药物、蛋白类药物、多肽、DNA、RNA、天然药物，而且微球可以使帮助药物实现给药方式的多元化，可以通过口服、肺部、鼻腔给药。因此纳米微球是一种非常有前景的载体形式，值得我们进一步的研究与推广。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球；

本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂；

本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球及总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球，包括以下各组分：总蟾毒内酯、PLGA、冻干保护剂。

各组分的重量为：总蟾毒内酯1～5份，PLGA5～50份，冻干保护剂0.5-5份

优选的，各组分的重量为：总蟾毒内酯1份，PLGA10份，冻干保护剂0.5份。

其中，所述高分子聚合物PLGA的分子量为0.5-50000，其乳酸：羟基乙酸单体的摩尔比例为75:25、50:50、25:75中的一种或者几种材料混合。

本发明还公开了一种所述总蟾毒内酯PLGA纳米微球的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照所述配比称取各组分，将总蟾毒内酯、PLGA加入有机溶剂中，作为分散相；

(2)F68水溶液为连续相；

(3)超声环境下将分散相缓慢注入连续相中，形成O/W乳剂，

(4)随即转移至磁力搅拌器上搅拌，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。