[发明专利]一种具降血糖功能的腊八豆及其加工方法

说明书

技术领域

本发明涉及通过利用具有降血糖功能的1-脱氧野尻霉（DNJ）高产菌株进行大豆发酵，制备一种高产DNJ食品——腊八豆，属于食品生产加工领域。

背景技术

1-脱氧野尻霉（简称DNJ）及其衍生物是一种哌啶类多羟基生物碱，能与糖苷酶所形成非常稳定复合物，且与糖苷酶的结合能力要远远高于糖与酶的结合能力，因此DNJ可作为一种竞争性糖苷酶抑制剂。当在消化道或者糖蛋白加工过程中，糖苷酶可被1-脱氧野尻霉素等多羟基生物碱竞争性结合，使得消化道内的糖类吸收发生障碍，并且糖蛋白寡糖链的合成出现异常，从而呈现出能抑制血糖升高、抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血压、抗氧化、延缓衰老等一系列生物学活性（陈华，2013）。

随着糖尿病日益全球化且青年化，糖尿病的治疗已成为医学界一个棘手的问题。最近糖尿病流行病学资料显示，中国有1.14亿糖尿病患者，18岁以上糖尿病患病率已经高达11.6%，中国已经成为全世界第一糖尿病大国。虽治疗糖尿病的药物种类繁多，但能长久立足临床的寥寥无几，DNJ及其衍生物作为高效的α-葡萄糖苷酶抑制剂，已广泛应用于治疗糖尿病药物的开发，天然DNJ更是公认的用于糖尿病治疗的零伤害生物制品。

传统腊八豆是以黄豆为原料，在腊月经简单腌制而成，具有开胃消食的工效，其成品中细菌种类杂且多，但DNJ极低。通过以高产DNJ的细菌菌株对黄豆进行发酵，开发一种新型的腊八豆，使其含有丰富的DNJ。通过长期食用此产品，并结合运动治疗对糖尿病初期患者达到很好的治疗效果。

发明内容

本发明目的是以大豆为原料经过微生物发酵方法制备出一种降血糖的功能性保健食品。

所用菌株LX-12为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens），该菌株于2015年4月15日保藏于位于湖北省武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCCNO：M2015234。

本发明的目的是通过以下方案实现的：

高产DNJ菌株固体发酵

步骤1：大豆原料准备:

将大豆放入3-4倍质量的水中10-30℃下浸泡8~16h或80-100℃下浸泡2~6h，倒掉多余水，然后121℃、0.1MPa高压灭菌30min制得培养基质。

步骤2：菌种制备:

将甘油管保存的解淀粉芽胞杆菌LX-12菌株在30-40℃，120-240r/min下以LB固体培养基（蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，琼脂粉20g，pH7.0~7.2，水1000mL，121℃、0.1MPa高压灭菌30min）进行复活；复活菌株用LB液体培养基（蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，pH7.0~7.2，水1000mL，121℃、0.1MPa高压灭菌30min），装液量30mL/500mL三角瓶，37℃，200r/min进行扩大培养6-12h，制得种子液。

步骤3腊八豆的制作

将上述所得种子液按照2~10%（V/W）的接种量接入步骤1的培养基质中，搅拌混匀，37℃静置培养2-4天。检测腊八豆（湿重）中DNJ的含量在100-500mg/kg。

根据上述方法制得的腊八豆具有降血糖的作用。

附图说明

图1为1-脱氧野尻霉标品一级质谱图；

图2为发酵上清1-脱氧野尻霉一级质谱图；

图3为1-脱氧野尻霉标品二级质谱图；

图4为发酵上清1-脱氧野尻霉二级质谱图；

图5为1-脱氧野尻霉标品液相图；

图6为发酵上清1-脱氧野尻霉液相图。

具体实施方式

下面结合具体实例，对本方法进一步说明：

1、实施例1

本方法包括下列步骤：

①斜面保存或者甘油冻存的解淀粉芽胞杆菌LX-12菌种中挑取1-2环菌体，接种到LB培养基（重量百分比含有1.0%的蛋白胨、0.5%的酵母浸粉、1.0%的氯化钠，调节pH至7.2-7.4，121℃高压灭菌20min）中，于37℃，180r/min摇瓶培养9h，得到一级种子液；

②液体扩大LB培养基中以2%的接种量接种一级种子液，于37℃，180r/min摇瓶培养7h，得到二级种子液；

③将黄豆放入容器，加入4倍重量的10~30℃冷水浸泡12h，倒掉多余的水，将其分装于培养容器中，厚度为两层黄豆厚，用封口膜封好，121℃，0.1MPa高压灭菌30min，得到固体培养基质；