[发明专利]一种克林霉素磷酸酯的分析方法

权利要求书

1.一种克林霉素磷酸酯氧化杂质，其结构为：

。

2.一种克林霉素磷酸酯氧化杂质的分析方法，其包括如下步骤：

（1）母液的制备：精密称取克林霉素磷酸酯1882.48mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，室温放置，作为母液；

（2）氧化：精密吸取母液1ml，置25ml量瓶中，加入2ml2%双氧水溶液，充分摇匀，室温下放置30min，加流动相稀释至刻度，摇匀；

（3）分离：精密量取上述溶液20μl注入高效液相色谱仪，利用二维液相进行分析和检测，高分辨质谱确定该氧化杂质的精确质量为521.1200，其元素组成为C₁₈H₃₅N₂O₉PSCl，结构为：。

3.根据权利要求2所述的克林霉素磷酸酯氧化杂质的分析方法，其特征在于：

A、一维液相色谱条件：

流动相A：0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：乙腈=790：210，v/v；

流动相B：0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：乙腈=400：600，v/v；

柱温30℃；

流速为每分钟1.1ml；

检测波长为210nm；

梯度洗脱条件：

B、二维液相色谱条件：

流动相A：0.1%甲酸；

流动相B：乙腈；

C：高分辨质谱：安捷伦Q-TOF，电压为+175V；

截取一维液相中较大的未知杂质，进入二维液相，起始1分钟冲去磷酸盐，再将样品冲入高分辨质谱仪。

4.根据权利要求2所述的克林霉素磷酸酯氧化杂质的分析方法，其特征在于：所述流动相为0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：乙腈=790：210，v/v。

5.根据权利要求3或4所述的克林霉素磷酸酯氧化杂质的分析方法，其特征在于：所述0.1mol/L磷酸二氢钾溶液采用450mg/mL的氢氧化钾溶液调pH值至6.0得到。

6.根据权利要求3所述的克林霉素磷酸酯氧化杂质的分析方法，其特征在于：所述的较大的未知杂质的相对保留时间为0.33。