[发明专利]酶联免疫试剂盒及制备和利用其进行胃蛋白酶检测的方法

权利要求书

1.一种酶联免疫试剂盒，其特征在于，包括：

盒体；

酶标板，其包括多个微孔，所述微孔内包被有胃蛋白酶单克隆抗体，所述酶标板容置在盒体内；

试剂瓶，其容置于盒体内，所述试剂瓶内分别装有工作液、标准溶液、缓冲液、洗涤液及显色液，其中所述工作液含有酶标胃蛋白酶抗体。

2.如权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述酶标胃蛋白酶抗体的标记物为辣根过氧化物酶，采用过碘酸钠法进行标记。

3.如权利要求2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述标准溶液为梯度浓度的氯霉素系列标准溶液，所述标准溶液内氯霉素的浓度分别为0ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、60ng/ml、80ng/ml及100ng/ml；

所述显色液的化学发光底物为鲁米诺；以及

所述胃蛋白酶为人胃蛋白酶。

4.如权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述盒体顶部开口，盒体的开口处设置有可抽拉的盖体；

所述盒体内还设置有带有凹槽和多个竖直孔洞的卡板；

所述酶标板水平嵌入在所述卡板的凹槽内，所述试剂瓶分别嵌入在所述卡板的孔洞内。

5.如权利要求4所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，

所述盖体为透明设置；

所述盖体与盒体的连接方式为：所述盒体开口的两侧设置有第一卡槽，所述盖体两侧设置有与第一卡槽相匹配的凸条，使盖体可沿所述第一卡槽滑动，以使盒体打开或合盖；

其中，所述第一卡槽的两端分别设置有1个限位块；沿所述盖体两侧凸条的外侧开设有第二卡槽，所述第二卡槽内设置有滚珠，使盖体沿所述第一卡槽滑动时所述滚珠能够沿所述第二卡槽同向自由滚动，并在滚珠抵达所述限位块位置及第二卡槽端部时停止，以使所述盖体停止滑动并得到定位；

此外，所述盖体两端分别设置有密封件，所述密封件与所述盖体的两端为90-180°可弯折连接，使密封件向下弯折90°时可贴附所述盒体两侧以将盒体密封；向上弯折时可解除盒体的密封并使盖体进行滑动；

所述盖体两侧沿所述第二卡槽设置有密封条。

6.如权利要求4所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述卡板的孔洞深度大于所述试剂瓶的高度，且所述孔洞底部设置有弹簧，所述试剂瓶底部设置有用于与弹簧相吸附的磁扣，以将试剂瓶与弹簧活动连接；

其中，所述弹簧的高度以其上放置试剂瓶后的自然状态下，试剂瓶顶部高于所述孔洞开口边缘0.8-1.5cm为准；

此外，所述卡板的大小与所述盒体的内部相对应，使卡板可嵌入并固定在盒体内；所述卡板的上表面低于所述盒体开口边缘1.8-2.2cm；以及

所述酶标板上的微孔设置为48或96个，所述酶标板上覆盖有密封膜。

7.一种如权利要求3所述的酶联免疫试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、胃蛋白酶单克隆抗体的制备，提取人胃粘膜分泌物中的胃蛋白酶，将纯化后的胃蛋白酶免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤融合技术制备得到所述胃蛋白酶单克隆抗体；

步骤二、酶标板的制备，将所得胃蛋白酶单克隆抗体稀释后，加入所述微孔中进行包被，即得所述酶标板；

步骤三、酶标胃蛋白酶抗体的制备，制备辣根过氧化物酶溶液，将胃蛋白酶单克隆抗体与所述辣根过氧化物酶溶液混合反应，然后在得到的反应液中加入NaBH₄溶液后进行超滤，留取超滤截留物即得所述酶标胃蛋白酶抗体。