[发明专利]产能检测磺胺药物的蛋白质的重组大肠杆菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大肠杆菌是大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)-pET28b-flop，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.10068。

2.构建重组大肠杆菌的方法，包括将蛋白质flop的编码基因导入受体大肠杆菌中得到产所述蛋白质flop的重组大肠杆菌；

所述蛋白质flop为如下a)或b)的蛋白质：

a)由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b)将SEQ ID No.1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有蛋白质flop活性的由a)衍生的蛋白质。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述蛋白质flop的编码基因为如下1)或2)或3)的核酸分子：

1)其编码序列是SEQ ID No.2的DNA分子或cDNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质flop的DNA分子或cDNA分子；

3)与1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码所述蛋白质flop的DNA分子或cDNA分子。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述蛋白质flop的编码基因通过重组表达载体导入所述受体大肠杆菌中。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述受体大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)；所述重组表达载体是将所述蛋白质flop的编码基因插入载体pET-28b(+)的多克隆位点得到的重组表达载体。

6.根据权利要求2-5中任一所述的方法，其特征在于：所述重组大肠杆菌为权利要求1所述的重组大肠杆菌。

7.由权利要求2-5中任一所述方法构建的重组大肠杆菌。

8.权利要求2所述蛋白质flop的制备方法，包括培养权利要求1所述的重组大肠杆菌或权利要求7所述的重组大肠杆菌，得到权利要求2所述蛋白质flop。

9.下述1)-8)中的任一种应用：

1)权利要求1所述的重组大肠杆菌在生产权利要求2所述蛋白质flop中的应用；

2)权利要求2-5中任一所述的方法在生产权利要求2所述蛋白质flop中的应用；

3)权利要求7所述重组大肠杆菌在生产权利要求2所述蛋白质flop中的应用；

4)权利要求1所述重组大肠杆菌在检测磺胺药物中的应用；

5)权利要求2所述蛋白质flop在检测磺胺药物中的应用；

6)权利要求2-5中任一所述的方法在检测磺胺药物中的应用；

7)权利要求7所述的重组大肠杆菌在检测磺胺药物中的应用；

8)权利要求8所述的制备方法在检测磺胺药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述磺胺药物为磺胺异噁唑、柳氮磺胺吡啶、磺胺苯吡唑、磺胺吡啶、磺胺甲二唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺噻唑、磺胺苯酰、磺胺喹噁啉、磺胺甲氧吡嗪、磺胺索嘧啶、磺胺醋酰、磺胺甲噁唑、磺胺氯哒嗪、磺胺乙氧哒嗪、磺胺甲氧嘧啶、磺胺甲噻唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺胍、磺胺间甲氧哒嗪、磺胺硝苯、磺胺嘧啶、磺胺溴二甲嘧啶、氨苯磺胺、磺胺多辛和酞磺胺噻唑中的全部或部分任一种。