[发明专利]一种表面有含外套膜细胞水凝胶层的珍珠核及其制备方法

说明书

本发明公开了一种表面覆盖有含外套膜细胞水凝胶层的珍珠核及其制备方法，属于人工养殖珍珠的生产领域。将珍珠蚌外套膜细胞酶解分离为单个游离细胞，预混在高分子水溶液中，然后使其在珍珠核表面凝胶，形成厚度基本均匀的含外套膜细胞的水凝胶，从而使外套膜细胞在珍珠核周围形成基本均匀分布，解决了传统外套膜细胞小片植入法存在的外套膜表皮细胞在珍珠核周围分布不均的问题。

技术领域

本发明涉及一种珍珠核及其制作方法，具体的说涉及一种表面覆盖包裹有其中含有贝类动物外套膜表皮细胞的、由生物可降解高分子材料交联形成的水凝胶层的珍珠核及其制备方法。

背景技术

目前有核珍珠的人工培养方法通常都是采用取自供体蚌的外套膜细胞小片与用贝壳制备的珍珠核一起植入育珠蚌的插核部位，然后放入养殖场所中养殖培育珍珠，养殖一段时间后杀蚌取珠。在育珠蚌体内，从外套膜细胞小片游离出来的外表皮细胞会逐渐迁移至珍珠核表面，结缔组织细胞等一些其他类型细胞则围绕在外表皮细胞周围，并与育珠蚌自身的结缔组织之间建立连接，围绕珍珠核形成珍珠囊，外表皮细胞(可能还有一些其他类型细胞)分泌珍珠质形成珍珠。这种方法由于植入时细胞小片只贴于珍珠核的一侧，在细胞迁移过程中，外套膜细胞容易在珍珠核周围分布不均，很多时候细胞小片所在位置的细胞大量堆积，已经开始分泌珍珠质，但珍珠核远离细胞小片的部位细胞尚未迁徙到，因此形成的珍珠囊厚薄不均，导致培育的珍珠形状、色泽不均匀，圆形珍珠数量少，存在尾巴珠、瑕疵珠等问题，优质珍珠生产率低。如果能使外套膜表皮细胞在珍珠核周围形成基本均匀的分布，则可形成厚薄均匀的珍珠囊，从而大大提高优质圆形珍珠的比例。

为解决这个问题，“游离细胞植入法培育有核珍珠”(中国发明专利号：200510110378.8)公布了一种通过将游离外套膜细胞与珍珠核共培养，使得外套膜细胞粘附在珍珠核的表面，然后将粘附了外套膜细胞的珍珠核插入育珠蚌的插核部位来培养珍珠的方法。此方法存在以下问题：⑴正常表皮细胞在人工培养的条件下只能贴壁生长成单层，细胞量过少，细胞种类单一。因此该发明通过在插核前后再另外滴入大量细胞液来解决细胞量不足和细胞种类单一的问题。⑵能贴附于珍珠核表面生长的细胞只有表皮上皮细胞，但珍珠囊的形成也需要来自外套膜的结缔组织细胞。⑶球形珍珠核容易滚动，容易因碰撞等导致细胞损伤脱落，在运输、植核等过程中难以保证不损伤细胞等问题。因而至今未能在生产实践上得到应用。

用胶原蛋白、海藻酸钠、明胶等高分子材料制备的水凝胶支架因含水量高、氧气、营养物质及代谢废物容易运输、液固方便转换、生物相容性好、可降解、制作工艺简单以及易于交联可溶性生长因子等优点而广泛应用于人体组织工程中。本发明利用高分子材料水凝胶的这些性质，将珍珠蚌游离外套膜细胞预混在生物可降解高分子材料的水溶液中，然后使高分子材料在珍珠核表面交联，形成厚度基本均匀的含外套膜细胞的水凝胶层，从而使得外套膜细胞在珍珠核周围形成基本均匀分布，植入到育珠蚌体内后，凝胶支架材料会逐渐降解，外套膜表皮细胞会逐渐迁移到珍珠核表面形成厚度基本均匀的珍珠囊，从而在珍珠核表面均匀分泌珍珠质。本发明解决了传统外套膜细胞小片植入法存在的外套膜表皮细胞在珍珠核周围分布不均的问题，可以大大提高优质珍珠的比例。

发明内容

本发明的目的是提供一种人工养殖珍珠所使用的珍珠核的处理方法，通过在珍珠核周围包裹一层厚度基本均匀的含珍珠蚌外套膜细胞的水凝胶层，使珍珠蚌的外套膜表皮细胞能基本均匀地分布到珍珠核的周围形成珍珠囊，从而提高优质珍珠的生产效率。

为实现上述发明目的，本发明采用了以下技术方案：

一、本项目的技术线路：获取外套膜游离细胞→配制高分子材料水凝胶溶液→将外套膜表皮细胞与高分子材料水凝胶溶液混合均匀→将珍珠核放置于模具中，然后将混合液灌注入模具中，使混合液基本均匀分布在珍珠核周围，使高分子材料交联形成含有外套膜表皮细胞的水凝胶层。此即为本发明所说的含有外套膜细胞的水凝胶珍珠核。此外，也可以将珍珠核先与外套膜外表皮细胞共同培养，使珍珠核表面先贴附上单层外套膜外表皮细胞，然后再按上述技术路线将其表面覆盖上含外套膜细胞的水凝胶层。