[发明专利]一种用于治疗非小细胞肺癌的新型病毒疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和肿瘤学诊断领域，尤其涉及一种用于治疗非小细胞肺癌的新型病毒疫苗及其制备方法。

背景技术

公开统计资料显示，全世界肺癌发病率及死亡率占所有恶性肿瘤的第1位，每年全世界新诊断病例高达1，200，000例。根据卫生部统计资料（1992-1997），大城市中男性肺癌死亡率占所有恶性肿瘤的38%，女性占16%，均居首位，占所有肿瘤发病的约25%；因肺癌死亡约40/10万，占所有肿瘤死亡的约38%；我国每年因肺癌死亡的人数达50万人。近30年我国肺癌发病率及死亡率呈逐年上升趋势；其中非小细胞性肺癌约占80％，而且大多数患者在明确诊断时已是肿瘤晚期，预后往往很差；可手术的只占25%。所有NSCLC的5年生存率只有15%。即使可手术的患者，术后虽经各种治疗，ⅠA期患者的5年生存率也只有67%，ⅢA期患者5年生存率只有23%。

借助于不断进步的现代科学技术手段，人们对于肿瘤的认识已经深入到细胞、分子和基因水平，对于肿瘤诊断和治疗技术的掌握已经不再停留在部位和器官形态学阶段，而是结合形态和功能改变，逐渐向细胞学、分子生物学乃至基因组学分类诊断和治疗的方向纵深发展。与此同时，随着材料科学、计算机技术、数字成像技术的飞速发展，生物医学工程技术学与临床肿瘤学诊疗技术的结合越来越紧密，从而诞生了许多肿瘤细胞免疫疗法。

免疫系统是人体的防御体系，一方面发挥着清除细菌、病毒、外来异物的功能，另一方面消除体内衰老细胞以及发生突变的细胞（有的突变细胞会变成癌细胞）。机体免疫系统和癌细胞相互作用的结果可决定癌症的最终演变。对于健康的人来说，其免疫系统的强大足以及时清除突变的癌细胞。但对于癌细胞病人来说，普遍存在免疫系统低下，不能有效地识别、杀灭癌症细胞；另一方面，癌症细胞大量增殖，会进一步抑制患者的免疫功能，而且，癌症细胞有多种机制来逃脱免疫细胞的识别与杀伤。

肿瘤细胞免疫治疗就是借助分子生物学技术和细胞工程技术，提高癌症的免疫原性，给机体补充足够数量的功能正常的免疫细胞和相关分子，激发和增强机体抗瘤免疫应答，提高肿瘤细胞对机体抗癌症免疫效应的敏感性；或者在体内外诱导癌症特异性和非特异性效应细胞和分子的产生，最终达到清除癌细胞的目的。目前临床上应用的大多数生物细胞免疫疗法，其作用不是杀死全部癌症细胞，而是在通过手术、放疗、化疗等手段使得癌症细胞负荷明显降低后，促进机体免疫功能迅速恢复，并通过清除微小的残留病灶、抑制残留癌症细胞增殖的方式来治疗肿瘤。

美国FDA于2008年12月，我国卫生部也于2009年5月正式批准DC诱导的细胞免疫治疗应用于临床。2011年诺贝尔医学奖颁发给了DC以及DC诱导肿瘤免疫的发现者，蒙特利尔大学的RalphM.Steinman教授，以表彰他在肿瘤免疫治疗领域的巨大贡献。美国NIH报告应用TIL对恶黑进行治疗，总体有效率高达72%，令世界广泛关注。美国NIH预言，细胞治疗可能会成为能够彻底治愈肿瘤的唯一手段。

随着现代肿瘤学、免疫学理论和分子生物学技术的飞速发展，众多表位的发现和肿瘤相关抗原的研究成果为肿瘤的免疫治疗开创了一种全新的有希望的治疗方式，以适宜的肿瘤特异性抗原作为疫苗对恶性肿瘤进行免疫治疗的方法日益受到重视。参与机体抗肿瘤免疫排斥反应的主要角色是T细胞，而T细胞的活化依赖于对肿瘤特异性抗原的识别。在过去的几年里，有很多种人类的肿瘤相关抗原被鉴定出来，这些肿瘤抗原包括：（1）肿瘤睾丸抗原，如MAGE、BAGE和GAGE家族等；（2）分化抗原，如MART-1、gp100等；（3）过表达的癌基因和抑癌基因等，如ras和HER-2等；（4）病毒抗原，如HPV-E6等；（5）肿瘤独特性抗原，如CDK4和MUM-1等。这些肿瘤抗原在临床上的应用也取得了一定的效果，但是最终其治疗效果总是不能让人满意。

黑素瘤抗原（Melanomaantigen,MAGE）基因是最早被发现的一族人类肿瘤特异性抗原基因。MAGE基因家族编码的肿瘤排斥抗原，经加工产生抗原肽，再由抗原加工相关转运蛋白(TAP)转送至内质网，在此与HLA-I类分子结合形成复合物，再经高尔基体表达于细胞表面。CTL通过其表面的抗原受体识别抗原肽和HLA-I类分子复合体，引起其对相应肿瘤细胞的特异性免疫杀伤效应。鉴于MAGE的肿瘤特异性表达及其表达产物能被CTL识别的特性，人们逐渐认识到其在肿瘤特异性免疫治疗中的潜在价值，MAGE抗原肽是一种CTL介导的肿瘤特异性免疫治疗的理想靶分子。