[发明专利]一种可视化多色检测抗原‑抗体反应试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种可视化多色检测抗原-抗体反应试剂盒，其特征是由标记了甲基红修饰石墨烯的CEA抗体，标记了酚酞修饰石墨烯的NSE抗体，标记了百里酚酞修饰石墨烯的Cyfra21-1抗体和包被有CEA、NSE和Cyfra21-1单抗混合物的96孔板，pH值为12.0碱水，PBST缓冲液组成。

2.根据权利要求1所述一种可视化多色检测抗原-抗体反应试剂盒的使用方法，其特征是由以下步骤构成：

(1)制备多抗体标记的96孔板：将多抗原的单抗以一定浓度比例混合后孵育96孔板，洗涤后再用胎牛血清或山羊血清或马血清进行封闭，封闭时间为30～120分钟，封闭温度为25～40℃，处理的目的是为了使标记的抗体能够与待测样品充分而稳定的反应；

(2)抗原抗体反应：向步骤(1)中加入待测样品，洗涤后加入修饰有变色小分子的石墨烯标记的抗体，充分反应后去除未反应的多余石墨烯标记的抗体，所述变色小分子为甲基红MR或酚酞PP或百里酚酞TP或溴甲酚紫BP或溴甲酚绿BG；优选为MR、PP和TP，MR、PP和TP与石墨烯分子的质量比分别为1：13.4～53.8，1：15.9～95.4，1：4.3～43，所述石墨烯标记的抗体为单抗或多抗，三种变色分子功能化石墨烯的抗体混合物中的浓度配比为1.5:1:0.5，所述抗原-抗体反应的孵育时间为30～120分钟，孵育温度为25～40℃；

(3)可视化检测：向步骤(2)反应体系中加入碱性水，充分反应后根据反应体系颜色的变化判断样品中是否发生反应，所述碱性水pH值为10.0～13.0，用20mM氢氧化钠调配，所述反应体系的颜色变化在3～15分钟内出现。

3.根据权利要求1所述一种可视化多色检测抗原-抗体反应试剂盒，其特征是可同时可视化检测多种抗原抗体反应。