[发明专利]一种中药注射剂微量树脂的检查方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药注射剂的检查方法，尤其涉及一种中药注射剂微量树脂的检查方法，属于中药注射剂安全性评价领域。

技术背景

中药注射剂最早产生于上世纪四十年代，由钱信忠等学者开创，现已广泛应用于临床。2010年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)一部就收录有灯盏细辛等单方和复方注射剂。中药注射剂能提升药效、使某些中药的疗效能得到更好地发挥，在推进中药剂型发展，拓展中药的应用范围，服务广大人民健康等方面的确功不可没。从技术上来讲，业界大体上已经解决了中药注射剂的有效性问题(尽管作用机制尚不完全清除)，安全性依然是业界难题。

随着中药注射剂的广泛应用，不良反应不断发现，甚至致死性不良反应也屡有报道。近年来发生的“清开灵注射液事件”、“双黄连注射液事件”、“鱼腥草注射液事件”等说明中药注射剂的安全性不容忽视，受到业界甚至公众的广泛关注。

传统中药的疗效最早来自口服和外用，没有注射给药方式。大多中药注射剂的研发也源自口服剂的疗效，如清开灵注射液、双黄连注射液、丹参注射液和灯盏细辛注射液。口服能够吸收的中药成分基本上都属于小分子物质，因为大分子物质不易吸收，或者需降解之后才能吸收，而降解产物吸收后不可能在机体重新组装成原来的大分子物质。

中药注射剂具有生物提取物的特征，目前的制备流程没有针对性的大分子物质去除工艺。因此，中药注射剂含有小分子物质，也含有少量或微量的大分子物质。大分子和小分子尚无统一的分子量界限，但学术界对于“分子量越大口服越难吸收”的观点深入人心。以2010年版《中国药典》二部收载的2271个药物(品种)为例，在治疗全身性疾病的口服化学药物中，分子量大于500的较少见，超过1000的则罕见(只有环孢素、维生素B12、腺苷钴胺、依托红霉素4个，但吸收不太理想)，超过3000的则没有。分子量与吸收的关系实际上已经在药物设计方面得到了广泛应用。一般认为中药注射剂中可能含有的蛋白质、鞣质(缩合鞣质)、多糖、核酸和树脂均视为大分子物质，2000年版《中国药典》也对其中的蛋白质、鞣质和树脂开始进行检查。因此，我们推测，基于传统口服剂上升而来的中药注射剂疗效来自所含的小分子物质，与分子量大于3000的物质几乎无关。

由于中药注射剂具有生物提取物的特征，因此在提取的过程中不可避免地带来一些生物大分子，比如植物蛋白质、核酸等，还有可能带入鞣质、树脂、多糖等大分子。这些大分子口服是不能直接吸收的，必须经过消化道的降解才可能以小分子吸收。蛋白质是抗原性最强的常见物质，而且分子量越大抗原性越强，越容易引起过敏反应或类过敏反应。据此推测，中药注射剂含有的微量蛋白质是导致过敏或类过敏等特有不良反应的主要原因，其他大分子如多糖、核酸、鞣质、树脂等也可能参与了这些不良反应。因此中药注射剂的安全性很大程度上取决于所含的大分子成分。对来自中药的大分子成分分析如下：

热原：多为细菌的细胞壁的脂多糖成分，分子量较大，能引起恒温动物发热、休克、甚至死亡。

蛋白质：多为植物蛋白，部分为动物蛋白或微生物蛋白。蛋白质类物质是抗原性较强的化学物质，能引起各种过敏反应(包括I、II、III、IV型)。由于与人的种属差异较大，中药注射剂含有的蛋白质类大分子的抗原性均较强。

鞣质：鞣质是引起中药注射剂注射后疼痛的主要物质之一。鞣质后蛋白质结合为更大的分子复合物后，可增强蛋白质的过敏性。

多糖：蛋白多糖或糖蛋白本身就具有很强的抗原性，一般高于原有的蛋白质。单纯的多糖也能够通过“免疫佐剂”效应增强免疫的作用，即也能增强过敏反应。

核酸：具有免疫调节作用，多通过“免疫佐剂”效应增强过敏反应。

树脂：是一类分子量较大的聚合物，可以引起疼痛，也可增强免疫反应。

现有中药注射剂的生产工艺一般都采用“醇水法”或“水醇法”制备中药注射剂的原料。“醇水法”主要是采用乙醇提取中药材，回收溶剂后再加水去除沉淀后制得；而“水醇法”则主要是采用水提取药材，适当浓缩然后用80％左右的乙醇沉淀，将上清液制备成原料。除此之外还有“酸碱法”等。然而，这些方法制得的原料均不同程度地含有大分子杂质，如含有蛋白质、多糖、核酸、鞣质、树脂等。对于蛋白质和鞣质，前期有人建立了灵敏的中药注射剂微量蛋白和鞣质检查方法。

因此，尽管《中国药典》已有树脂检查方法，为了能进一步从严控制中药注射剂中的大分子物质，仍需要开发一种方法，以便能更灵敏地检查中药注射剂中的微量树脂。

发明内容