[发明专利]CIK及其制备方法有效
| 申请号： | 201510425461.8 | 申请日： | 2015-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN105154398A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 曾宪卓;成杰 | 申请（专利权）人： | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cik 及其 制备 方法 | ||
1.一种CIK制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
获取单个核细胞；
将所述单个核细胞用400～600U/mL的r-干扰素进行初次诱导培养；
将所述初次诱导培养后的细胞进行第二次诱导培养；其中，该第二次诱导培养于200～300U/mL的r-干扰素、90～110ng/mL的CD3单抗、90～110ng/mL的CD28单抗、8～12ng/mL的IL-1a和450～550U/mL的IL-2条件下进行；
将所述第二次诱导培养后的细胞进行第三次诱导培养；其中，该第三次诱导培养于40～60U/mL的r-干扰素、15～25ng/mL的CD3单抗、15～25ng/mL的CD28单抗、3.2～4.8ng/mL的IL-1a、450～550U/mL的IL-2和450～550U/mL的IL-15条件下进行。
2.如权利要求1所述的CIK制备方法，其特征在于，将所述第二次诱导培养后的细胞进行第三次诱导培养步骤之后，还包括：
继续培养细胞至成熟，收获CIK。
3.如权利要求2所述的CIK制备方法，其特征在于，所述继续培养细胞至成熟步骤中，培养过程于900～1100U/mL的IL-2条件下进行。
4.如权利要求1至3任一项所述的CIK制备方法，其特征在于，所述初次诱导培养采用的培养基为LONZAX-VIVO15淋巴细胞无血清培养基；
和/或，所述第二次诱导培养采用的培养基为LONZAX-VIVO15淋巴细胞无血清培养基；
和/或，所述第三次诱导培养采用的培养基为LONZAX-VIVO15淋巴细胞无血清培养基。
5.如权利要求1至3任一项所述的CIK制备方法，其特征在于，所述初次诱导培养过程中，诱导培养的时间为20～28h。
6.如权利要求1至3任一项所述的CIK制备方法，其特征在于，所述第二次诱导培养过程中，诱导培养的时间为20～40h。
7.如权利要求1至3任一项所述的CIK制备方法，其特征在于，所述第三次诱导培养过程中，诱导培养的时间为20～40h。
8.一种如权利要求1至7任一项所述的CIK制备方法制备的CIK。
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