[发明专利]胰岛素样生长因子特异性结合蛋白及其用途

说明书

本申请是2006年12月8日提交的题为“胰岛素样生长因子特异性结合蛋白及其用途”的国家申请号为200680052595.9(PCT/US2006/047059)的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

根据美国法典第35章第119条，本申请要求2005年12月13日申请的美国临时申请序号60/750,085、2005年12月14日申请的美国临时申请序号60/750,772、2005年2月17日申请的美国临时申请序号60/774,747以及2006年5月24日申请的美国临时申请序号60/808,183的优先权，所述各临时申请整体在此引入作为参考。

技术领域

本发明涉及能结合胰岛素样生长因子-2(IGF-II)但与胰岛素样生长因子-1(IGF-I)有交叉反应性的结合蛋白，以及这些结合蛋白的用途。更具体地讲，本发明涉及针对IGF-II但与IGF-I有交叉反应性的单克隆抗体以及这些抗体的用途。本发明的若干方面还涉及表达这些抗体的杂交瘤或其它细胞系。

背景技术

胰岛素样生长因子IGF-I和IGF-II是参与调节细胞增殖、存活、分化和转化的小多肽。IGF主要通过与特定细胞表面受体--IGF-I受体(IGF-IR)相互作用并激活多种胞内信号转导级联而发挥其多种作用。IGF在血清中循环，主要结合IGF-结合蛋白(IGFBP-1至IGFBP-6)。IGF与IGF-IR的相互作用受到IGFBP的调节，IGF一旦从IGFBP中释放出来(主要通过IGFBP的蛋白水解)，就可以只结合IGF-IR。IGF-I还可以结合由IGF-IR和胰岛素受体(IR)亚基组成的杂合受体。业已表明，IGF-II能结合胰岛素受体的“A”同等型(isoform)。

恶性转化包括诸如细胞生长、分化、凋亡和转化等多种过程的不平衡。IGF-I和IGF-II涉及多种病症的病理生理，被认为是由于受体IGF-IR介导的促有丝分裂和抗凋亡特性而在肿瘤发生中起作用。LeRoith和Roberts，CancerLett.195：127-137(2003)。

IGF-I是作为肝脏在垂体生长激素调控下产生的生长因子而被发现的，最初被称为生长调节素-C。Salmon等，J.Lab.Clin.Med.49：825-826(1957)。IGF-I和IGF-II均广泛表达，通过它们与IGF-IR的相互作用而充当内分泌、旁分泌和自分泌生长因子，IGF-IR为在结构和功能上与胰岛素受体(IR)相关的跨膜酪氨酸激酶。IGF-I主要通过激活IGF-IR起作用，而IGF-II可通过IGF-IR或通过IR-A同种型起作用。LeRoith和Roberts，CancerLett.195：127-137(2003)。另外，IGF-I和IGF-II这二者与IGF-结合蛋白相互作用可影响IGF的半衰期和生物利用度，以及在某些情况下影响它们与受体的直接相互作用。Rajaram等，Endocr.Rev.18：801-831(1997)。

IGF-I对细胞增殖、分化和凋亡具有长期影响。在培养的骨肉瘤和乳癌细胞中的试验提示，IGF-I是有效的有丝分裂原，通过增加DNA合成和通过刺激细胞周期蛋白D1的表达发挥其促有丝分裂作用，该作用加速了细胞周期由G₁期向S期的进程。Furlanetto等，Mol.Endocrinol.8：510-517(1994)；Dufourny等，J.Biol.Chem.272：311663-31171(1997)。在胰腺癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的抑制消除了IGF-I的促有丝分裂作用。Kornmann等，J.Clin.Invest.101：344-352(1998)。除了刺激细胞周期进程以外，IGF-I还抑制细胞凋亡。已表明，IGF-I刺激Bcl蛋白的表达，但抑制Bax的表达，这导致Bcl/Bax异二聚体的相对量的增加，由此阻断凋亡途径的启动。Minshall等，J.Immunol.159：1225-1232(1997)；Parrizas等，Endocrinology138：1355-1358(1997)；Wang等，Endocrinology139：1354-1360(1998)。