[发明专利]一种乳酸链球菌的发酵培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种发酵培养基，适用于乳酸链球菌发酵生产使用，具体地说，涉及一种乳酸链球菌的发酵培养基及其应用，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

    近年来，随着抗生素在畜牧业越来越广泛的应用，其弊端逐渐显现出来，耐药性细菌的产生、动物肠道菌群的失调、残留药物对人体的危害等方面使抗生素治疗受到限制。寻找天然无害且高效的抗菌活性物质已成为预防、治疗畜禽疾病的趋势。乳酸链球菌抗菌肽具有平衡胃肠道菌群，杀灭胃肠道病原菌，促进消化吸收等作用，对于鸡等较易发生的消化道疾病，如腹泻、传染性胃肠炎、鸡肠炎、沙门氏菌病等有极好的功效。

尽管乳酸链球菌抗菌肽有着显著的优势，然而由于其自身不能合成多种氨基酸、维生素及相关生长因子，因此导致营养要求和培养条件较为复杂。常用的乳酸链球菌培养基为MRS培养基，原料昂贵，尤其氮源成分价格比重较大，在生产中应用成本太高。生长过程中，菌体会产生乳酸等有机酸类代谢产物，使培养基的pH值不断下降，从而抑制乳酸链球菌的生长，导致菌体活性下降甚至死亡。因此，采用传统的发酵培养基，菌种密度较低，质量无法保证，且生产成本较高。

现有技术的乳酸链球菌培养基具有以下缺陷：乳酸链球菌的发酵时间长，制得的菌液含菌量低，提取的抗菌肽纯度低，抗菌效果不够理想，培养基成本高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种乳酸链球菌的发酵培养基，实现以下发明目的：

1、提高制备的乳酸链球菌菌液的含菌量；使含菌量为3.8-6.0×10⁹ cfu/ml；

2、提高培养的乳酸链球菌中提取的抗菌肽纯度；使纯度为63-72%；

3、提高培养的乳酸链球菌中提取的抗菌肽的抗菌效果；

4、缩短发酵培养乳酸链球菌的发酵时间；

5、降低发酵培养基的成本。

为实现上述发明目的，采用以下技术方案：

一种乳酸链球菌的发酵培养基，所述的发酵培养基包括下列组分：葡萄糖、玉米浆、磷酸氢二钾、醋酸钠、明胶、抗坏血酸钠、硫酸镁、硫酸锰、蒸馏水。

以下是对上述技术方案的进一步改进：

所述发酵培养基组分的总量份为：葡萄糖25-35份、玉米浆10-20份、磷酸氢二钾2-3份、醋酸钠3-5份、明胶1.5-2.5份、抗坏血酸钠0.4-0.6份、硫酸镁0.2-0.4份、硫酸锰0.05-0.1份、蒸馏水1000份。

所述发酵培养基包括以下重量份的组分： 葡萄糖30份、玉米浆15份、磷酸氢二钾2份、醋酸钠4份、明胶2份、抗坏血酸钠0.5份、硫酸镁0.3份、硫酸锰0.08份、蒸馏水1000份。

所述发酵培养基的制备方法包括调pH值步骤：调整溶液pH值至6.8～7.0。

所述发酵培养基的制备方法还包括灭菌步骤：采用高压蒸汽灭菌锅灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为30min。

一种乳酸链球菌的发酵培养基的应用，包括制备种子液、接种、发酵步骤。

所述的制备种子液步骤：乳酸链球菌菌种接种量为10g/L，制成的种子液的乳酸链球菌含量为1.0×10⁷-5.0×10⁷cfu/ml。

所述的接种步骤中种子液：培养基的体积比为4:100。

所述的发酵步骤：发酵温度为37-39℃，发酵罐的搅拌转速为120r/min，发酵罐内压力为0.05MPa。

采用本发明发酵培养基制备乳酸链球菌菌液，含菌量为3.8-6.0×10⁹ cfu/ml, 从得到的菌液中提取的乳酸链球菌抗菌肽纯度为63-72%。

采用本发明技术方案，与现有技术相比，具有以下有益效果：

1、采用本发明发酵培养基制备乳酸链球菌菌液，含菌量为3.8-6.0×10⁹ cfu/ml；

2、采用本发明发酵培养基生产提取的乳酸链球菌抗菌肽纯度为63-72%；

3、采用本发明发酵培养基生产提取的乳酸链球菌抗菌肽，对大肠杆菌的抑菌圈直径为8.11-9.36mm，效价为7723-8627 IU/mL；抗菌肽对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为8.56-9.05mm，效价为7824-8778 IU/mL；

4、采用本发明发酵培养基进行发酵培养乳酸链球菌，发酵时间为30-34小时；

5、本发明发酵培养基成本为1920-2321元/吨。

具体实施方式