[发明专利]一种用于生物样本的核酸提取方法及试剂

权利要求书

1.一种用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，该方法用于提取基因组核酸，步骤包括：将生物样本中先加入氢氧化钠溶液，然后加入裂解液进行裂解，得到裂解反应液；所述的裂解液中含有胍盐、乙二胺四乙酸二钠、表面活性剂、核酸助沉剂和缓冲剂；再在裂解反应液中加入乙醇溶液，最后采用无仪器核酸提取装置进行吸附、清洗和洗脱；其中，样本裂解的pH值为11～13。

2.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，氢氧化钠溶液的浓度为1～5wt％；氢氧化钠溶液的体积与生物样本溶液的体积比为6：1～3。

3.根据权利要求2所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，氢氧化钠溶液的浓度为3～4wt％；氢氧化钠溶液的体积与生物样本溶液的体积比为6：2～3。

4.根据权利要求2所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，氢氧化钠溶液的浓度为4wt％；氢氧化钠溶液的体积与生物样本溶液的体积比为6：2～3。

5.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述胍盐选自硫氰酸胍或盐酸胍，缓冲剂选自三羟甲基氨基甲烷，核酸助沉剂选自糖原，表面活性剂选自聚乙二醇辛基苯基醚。

6.根据权利要求5所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述裂解液中含有硫氰酸胍或盐酸胍4～8mol/L，乙二胺四乙酸二钠10～30mmol/L、糖原0.015～0.15mmol/L、三羟甲基氨基甲烷20～80mmol/L和聚乙二醇辛基苯基醚0.6～1.4v/v％。

7.根据权利要求6所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述裂解液中含有硫氰酸胍5～7mol/L，乙二胺四乙酸二钠15～25mmol/L、糖原0.03～0.12mmol/L、三羟甲基氨基甲烷40～60mmol/L和聚乙二醇辛基苯基醚0.8～1.2v/v％。

8.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，样本裂解的pH值为11～13；裂解的条件为常温处理或加热至90～100℃保温。

9.根据权利要求8所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，样本裂解的pH值为12～13；裂解的条件为常温处理或加热至90～100℃保温。

10.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述乙醇溶液的浓度为90～98v/v％；乙醇溶液所加入的体积为裂解反应液体积的0.5～1.5倍。

11.根据权利要求10所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述乙醇溶液的浓度为95～98v/v％；乙醇溶液所加入的体积为裂解反应液体积的1～1.2倍。

12.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述清洗液浓度为5～35mmol/L的醋酸钠溶液。

13.根据权利要求12所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述清洗液浓度为10～30mmol/L的醋酸钠溶液。

14.根据权利要求12所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于，所述清洗液浓度为10～25mmol/L的醋酸钠溶液。

15.根据权利要求1所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于所述洗脱液为浓度为0.25～1.25mmol/L的乙二胺四乙酸二钠溶液。

16.根据权利要求15所述的用于生物样本的核酸提取的方法，其特征在于所述洗脱液为浓度为0.25～1mmol/L的乙二胺四乙酸二钠溶液。