[发明专利]来源于抗生素溶杆菌OH13的吩嗪类化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物，其特征在于：该吩嗪化合物的结构式如式Ⅰ～式Ⅵ：

2.一种从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

第一步，抗生素溶杆菌OH13的种子液培养：挑取抗生素溶杆菌OH13菌种划线于NA培养基上，培养得平板菌种；从所述的平板菌种中挑取单菌落于NB培养液中，培养后得种子液；

第二步，抗生素溶杆菌OH13的发酵培养：将所述的种子液按接种于NB或10％TSB或R₂A培养液中，在转速为180～300pm的条件下发酵20-24h，即得发酵液；

第三步，吩嗪化合物的提取：首先将发酵液离心后取上清液，之后将该上清液采用乙酸乙酯进行浸提萃取，萃取后蒸干乙酸乙酯后再用有机溶剂进行溶解，溶解后挥发掉有机溶剂，得到粗提物，将该粗提物在≤0℃的条件下保存待用；

第四步，吩嗪化合物的精制：将所述的粗提物溶于有机溶剂后再经葡聚糖凝胶柱层析分离，甲醇洗脱依次得到组分1～6；其中，组分6为式Ⅲ所示化合物，组分5用高效液相色谱进一步分离，得到式Ⅰ所示化合物、式Ⅱ所示化合物、式Ⅳ所示化合物、式Ⅴ所示化合物和式Ⅵ所示化合物。

3.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：第一步中种子液的培养时间为24～36h。

4.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：第二步中种子液的接种量为1～5％。

5.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：第三步中有机溶剂为乙酸乙酯或甲醇或氯仿。

6.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：第四步中所用的有机溶剂为甲醇和丙酮的混合液。

7.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：第四步中所用葡聚糖凝胶柱层析法的凝胶为LH-20，80g，甲醇等度洗脱，10-15秒/滴。

8.根据权利要求2所述的从抗生素溶杆菌OH13发酵液中分离纯化所得的吩嗪化合物的方法，其特征在于：所用的HPLC纯化条件：

色谱柱型号：Agilent Eclipse XDB-C18 column,5μm,9.4×250mm；

流速：4mL/min；

检测波长：274nm；

流动相为：0min，20％乙腈，80％水；5min，45％乙腈，55％水；19min，50％乙腈，50％水；20min，60％乙腈，40％水；23-27min，100％乙腈；28-30min，20％乙腈，80％水。

9.权利要求1所述的吩嗪化合物在制备用于抗菌药物中应用。

10.权利要求1所述的吩嗪化合物在制备用于防治植物病原细菌药物中应用。