[发明专利]一种溶纤维蛋白乳酸菌豆豉的快速生产方法

权利要求书

1.一种溶纤维蛋白乳酸菌豆豉的快速生产方法

（1）黄豆预处理

A．挑选除杂：选用颗粒饱满、肉多、粒径大小基本一致；无霉变、无虫蛀、充分成熟，表皮无皱、有光泽的黄豆，剔除杂质；

B、浸泡：称取挑选除杂的黄豆，清洗后，黄豆与水的比例为1:2-3，25-30℃温水浸泡6-9h，浸泡程度以豆粒表面将涨未涨满状，即皮皱未完全舒展为宜；

C、蒸煮：将水倒出，沥干多余水分，放入玻璃容器中，蒙上纱布，110℃-121℃蒸煮8-15mins，蒸煮使黄豆熟而未过，手捏豆粒，豆粒柔软，豆皮能用手搓破；

（2）黄豆前发酵也即枯草芽孢杆菌发酵

将扩大培养的BacillussubtilisSYL-1菌株培养液，4℃、8000rpm、离心5-8mins，弃上清液，菌体沉淀用50ml灭菌生理盐水溶解，然后接种于冷却至40±2℃蒸煮后的黄豆中，搅拌均匀，26-32℃发酵42-54h,得豆豉半成品；

（3）黄豆后发酵也即乳酸菌发酵

将扩大培养的LactobacillusbrevisSYL-2菌株培养液，4℃、4000rpm、离心4-6mins，弃上清液，菌体沉淀用50ml灭菌生理盐水溶解，然后接种于豆豉半成品中，搅拌均匀，32-37℃发酵42-54h；发酵完毕放入4℃冰箱中后发酵72h，即得成品豆豉。

2.根据权利要求1所述的一种溶纤维蛋白乳酸菌豆豉的快速生产方法，其特征在于：

（1）黄豆前发酵菌株--枯草芽孢杆菌的获取，从云南传统发酵豆豉中筛选得到高产豆豉纤溶酶菌株SYL-1Bacillussubtilis，于-80℃冰箱中保存；

（2）培养基配制：普通肉汤22g，1L去离子水溶解，121℃高压灭菌15mins，冷却后4℃冰箱保存；

（3）菌株复壮：将保存的SYL-1Bacillussubtilis菌株从-80℃冰箱中取出，解冻后，取60μL接种至5mL灭菌营养肉汤培养基中，140-180rpm，37℃摇床培养42-54h；

（4）种子液制备：按3-5%的接种量，取1.5mL菌液接种至50mL灭菌营养肉汤培养基中，140-180rpm，37℃摇床培养42-54h。

3.根据权利要求1所述的一种溶纤维蛋白乳酸菌豆豉的快速生产方法，其特征在于：

（1）黄豆后发酵菌株--乳酸菌的获取，从云南传统发酵豆豉中筛选得到，SYL-2Lactobacillusbrevis，于-80℃冰箱中保存；

（2）MRS肉汤培养基配制：称取蛋白胨10.0g、Lab-lemco’powder8.0g、Yeastextract4.0g、Glucose20.0g/L、Tween-801mL、磷酸氢二钾2.0g、醋酸钠5.0g、柠檬酸三铵2.0g、七水硫酸镁0.2g、四水硫酸锰0.05g，1L去离子水溶解配置成pH6.2的培养基，121℃高压灭菌15mins，冷却后4℃冰箱保存；

（3）菌株的复壮：将保存的SYL-2Lactobacillusbrevis菌株从-80℃冰箱中取出，解冻后，取30μL接种至5mL灭菌MRS肉汤培养基中，置于37℃二氧化碳培养箱中，静置培养42-54h；

（4）种子液的制备：按2-3%的接种量，取1.0mL菌液接种至50mL灭菌MRS肉汤培养基中，37℃静置培养42-54h。