[发明专利]一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法及其应用

说明书

本发明公开一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法及其应用，制备方法包括以下步骤：取海参粉，加入去离子水，在水浴中加热；匀浆，得到海参匀浆液；调节pH值至7.0～10.0，加入蛋白酶I，进行酶解反应2～4h后，向所述反应体系中加入蛋白酶II，继续酶解2～4h，终止反应，得到海参蛋白水解液；灭活其中的蛋白酶I和蛋白酶II；冷却后离心除杂质，保留上清液；加入95％乙醇，静置后离心取上清液，调节上清液pH值至6.0～8.0，并将所述上清液通过截流分子量为3000～10000Da的超滤膜，收集超滤液，即得。采用本发明方法制备的海参蛋白肽对糖尿病和高脂血症患者可起到良好的降糖降脂作用，食用安全性高。

技术领域

本发明涉及水产品深加工及生物技术领域，特别涉及一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法及其应用。

背景技术

随着社会进步和经济发展，人们的生活方式发生了很大的改变，糖尿病和高脂血症等代谢性疾病的发病率逐年升高。据国际糖尿病联盟(International DiabetesFederation，IDF)统计，截止2013年，全球糖尿病人数已达到3.82亿。预计到2035年，全球将有5.92亿人受到糖尿病的困扰。目前，我国已成为糖尿病患者人数最多的国家，患者人数已接近1亿。长期高血糖会诱发机体脂肪代谢紊乱，导致血脂异常，增加心血管疾病的患病风险。据世界卫生组织(World Health Organization，WHO)公布数据显示，2008年全球大约有1730万人死于心血管疾病。截止2012年，我国心血管疾病患者人数为2.9亿，每年约有350万人死于心血管疾病。目前，治疗糖尿病的方法包括注射胰岛素和口服降糖药物，但是这些治疗方法易引起低血糖、肝脏损伤、乳酸中毒以及胃肠道不适等不良反应。对于高脂血症的治疗，常用的他汀类降脂药物，长期服用也会对人体产生毒副作用。因此，积极研究食物中的降糖降脂功能成分，开发来源于食物中的安全、天然、高效的降糖降脂肽产品已成为今后糖尿病和高脂血症等代谢性疾病非药物治疗的重要部分。例如中国专利201210462662.1，吴成业等利用中性蛋白酶水解紫菜，制备具有降糖降脂和降血压活性的海藻多肽。

海参是海洋中重要的食物和药物资源。海参体壁是海参主要食(药)用部位，含有丰富的胶原蛋白、黏多糖以及皂苷，其中海参蛋白含量占其体壁干重80％以上。海参蛋白富含多种生物活性序列，在适当的蛋白酶作用下可释放出来，成为具有抗氧化、免疫调节、降血压以及降糖降脂等生物学活性的肽段。近年来，海参蛋白水解产物的活性得到了广泛的研究。李伟等在中国专利201310215842.4中公开了具有免疫调节、改善睡眠和抗辐射功能的海参果汁饮料；刘凯等在中国专利201410114474.9中利用中性蛋白酶水解海参蛋白制备具有促进术后伤口愈合功效的海参蛋白肽。

目前，关于酶水解海参蛋白的专利技术大多采用单酶或复合酶一步水解的酶解模式，这种酶解模式不利于海参蛋白的水解，也不宜于海参蛋白中生物活性序列的释放。尽管王纳在中国专利201310278840.X中利用碱性蛋白酶和固定化酶(包括中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)分步水解海参蛋白，但为了提高固定化酶的酶解效率，需过滤除去碱性蛋白酶初步水解液中的不溶物，此过程会损失部分未水解的海参蛋白。此外，由于酶解过程中碱液的使用以及海洋生物与生俱来的腥味，会使制得的海参蛋白肽具有不良气味。汪秋宽等在中国专利201210053085.0中利用阴离子树脂对海参蛋白肽进行脱腥，此法操作繁琐且耗时、效率低，不利于工业化生产；吴庆林在中国专利201110449621.4中利用活性炭对海参蛋白肽进行去味处理，这种处理方法会损失蛋白多肽中的功能成分而降低其生物学活性。而采用微囊化技术既可以掩盖海参蛋白肽的不良气味，又不会损失多肽中的功能成分。

采用双酶分步水解模式提高海参蛋白的水解度，制备具有降糖降脂活性的海参蛋白肽以及利用微囊化技术提升其品质的研究尚未发现。因此，开发一种可控制的酶法制备高活性、风味优良的海参蛋白降糖降脂肽的方法具有重要的理论意义和应用价值。

发明内容