[发明专利]一种非缺失型α-地中海贫血基因检测的核酸膜条、试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及基因检测技术，特别涉及一种非缺失型α-地中海贫血基因检测的核酸膜条、试剂盒及检测方法。

背景技术

地中海贫血是一组溶血性贫血病，呈现常染色体隐性遗传规律，主要由α-珠蛋白基因或β-珠蛋白基因缺失、突变等缺陷，引起相应珠蛋白链的合成受到抑制或其功能丧失所致。该病在我国南方的广西、广东、海南、四川及贵州等省较为常见，可分为α-地中海贫血和β-地中海贫血两类。

α-地中海贫血主要由α-珠蛋白基因大片段缺失引起，同时少部分由α-珠蛋白基因点突变引起，由点突变引起的α-地中海贫血称为非缺失型α-地中海贫血。我国至少已报道12种非缺失型α-地中海贫血基因突变，9种位于α2基因、3种位于α1基因。位于α2基因的CD142(TAA﹥CAA)、CD125(CTG﹥CCG)、CD122(CAC﹥CAG)是我国最常见的三种非缺失型α-地中海贫血基因突变，分别产生Hb Constant Spring(CS)、Hb Quong Sze(QS)和Hb Westmead(WS)变异血红蛋白。据报导，广西地区的非缺失型α-地中海贫血基因突变发生率约为3.12％，α^WSα/发生率最高，其次分别为α^CSα/和α^QSα/，三种突变的发生率分别为1.55％、1.21％和0.36％。

根据临床表现，可将α-地中海贫血分成四类，分别为静止型、轻型、中间型(HbH)与重型。静止型在临床上无症状，血红蛋白含量(Hb)在正常范围内，除少数血液学红细胞指标可能有阳性发现外，红细胞形态多无明显异常，这类个体和健康人无异；静止型的基因型有-α/αα、α^WSα/αα。轻型在临床上无症状，血红蛋白含量(Hb)正常或略有降低，实验室血液学检查表现为典型的小细胞低色素症(MCV﹤80fl和/或MCH﹤27pg)；其基因型有-α/-α、--/αα、-α/α^WSα、α^CSα/αα、α^QSα/αα。中间型(HbH)在临床上多数表现为中度溶血性贫血，血红蛋白含量(Hb)在60-90g/L，实验室血液学检查表现为典型的小细胞低色素贫血特征，血红蛋白分析表现为HbA2和HbF含量正常或稍低，呈现出典型的HbH带；中间型(HbH)的基因型有--/-α、α^QSα/α^QSα、α^CSα/α^QSα、α^CSα/α^CSα。重型临床表现为Hb Bart’s胎儿水肿综合征，常于23-40周时在宫内或分娩后半小时内死亡。血红蛋白检测几乎全是Hb Bart’s，在孕12周后可通过B超进行诊断；其基因型有--/--。其中：-α表示一条染色体上有一个α1基因或α2基因缺失，如-α^3.7右侧缺失或-α^4.2左侧缺失，--表示一条染色体上α1基因和α2基因同时缺失，如--^SEA东南亚型缺失或--^THAI泰国型缺失。

实验室检测是地中海贫血诊断的主要方法，包括血液学表型分析和基因检测两大类。

血液学表型分析是地中海贫血的一线筛查指标。主要包括红细胞指标(如RBC计数、HGB、MCV和MCH等)的测定及血红蛋白分析(包括异常血红蛋白检测、Hb A2和Hb F定量检测)，分析结果可以初步诊断不同类型地中海贫血基因携带者。MCV﹤80fl和(或)MCH﹤27pg为地中海贫血共同的表型特征，同时Hb A2﹥3.5％，则可初步诊断为β地中海贫血，若Hb A2﹤3.5％、Hb F﹤3.0％(孕妇≦5.0％)，且无缺铁(iron depletion，ID)表现，则疑为α地中海贫血基因携带者。根据血液学表型分析判断地中海贫血类型，是指导下一步进行地中海贫血基因检测的依据，血液学表型分析在地中海贫血的实验室诊断和研究中占有非常重要的地位，同时，“基因型和表型相结合”这一操作理念也是进行遗传病诊断的基本原则。