[发明专利]一种幽门螺旋杆菌多价表位疫苗及其制备方法有效
申请号: | 201510336891.2 | 申请日: | 2015-06-18 |
公开(公告)号: | CN105169381B | 公开(公告)日: | 2018-07-10 |
发明(设计)人: | 郭乐;刘昆梅;徐广贤;汤锋;廖国玲;杨华 | 申请(专利权)人: | 宁夏医科大学 |
主分类号: | A61K39/106 | 分类号: | A61K39/106;A61K39/39;C12N15/70;C12N1/21;A61P1/04 |
代理公司: | 宁夏合天律师事务所 64103 | 代理人: | 杨丽坤;孙彦虎 |
地址: | 750004 宁夏回族自治区*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中性粒细胞激活蛋白 热休克蛋白 尿素酶 黏附 幽门螺旋杆菌 表位疫苗 人工基因 融合基因 霍乱毒素B亚基基因 幽门螺旋杆菌感染 霍乱毒素B亚基 大肠杆菌表达 基因合成技术 体液免疫应答 多表位疫苗 蛋白纯化 基因序列 多肽 抗体 可用 偶联 应答 制备 疫苗 合成 激发 疾病 防治 | ||
1.一种幽门螺旋杆菌多价表位疫苗,其活性成分是一条多肽,主要由霍乱毒素B亚基(CTB) 和多表位肽WAE构成,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如权利要求1所述的幽门螺旋杆菌多价表位疫苗,其编码 核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.如权利要求1所述的幽门螺旋杆菌多价表位疫苗,多表位肽WAE主要由尿素酶A和B双亚基、黏附素HpaA、热休克蛋白HSP60的优势Th和B细胞抗原表位或区段以及中性粒细胞激活蛋白NAP构成,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.如权利要求3所述的幽门螺旋杆菌多价表位疫苗,其中编码多表位肽WAE的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
5.包含权利要求2所述的核苷酸序列的表达载体,转基因细胞系及宿主菌。
6.如权利要求1所述的幽门螺旋杆菌多价表位疫苗,霍乱毒素B亚基(CTB)和多表位肽WAE之间的间隔序列为 DPRVPSS。
7.如权利要求4所述的幽门螺旋杆菌多价表位疫苗的制备方法,通过基因合成技术合成多表位肽WAE的核苷酸序列,将其融合在霍乱毒素B亚基(CTB)基因的下游,构建含有融合基因CWAE的重组表达载体pETCWAE及其重组基因工程菌,重组基因工程菌株发酵后,经Ni-NTA 镍离子交换层析,获得该疫苗的融合蛋白CWAE。
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