[发明专利]一种德谷胰岛素结晶的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种德谷胰岛素结晶的制备方法及应用。本发明通过在0.05～0.27M组氨酸体系，并且含体积百分比8～15％有机溶剂的条件下，从含有德谷胰岛素、锌离子、酚类物质及盐的结晶液中，在pH值为6.5～8条件下使德谷胰岛素结晶，得到德谷胰岛素结晶。该制备方法生产效率高，稳定性好，因此，可用于工业化制备德谷胰岛素结晶。

技术领域

本发明涉及人胰岛素类似物结晶的制备方法，具体涉及一种德谷胰岛素结晶的制备方法及应用。

背景技术

糖尿病是一种常见的以高血糖为特征的终身性代谢疾病，近年来随着各国社会经济的发展和居民生活方式的改变，肥胖人群和糖尿病患病人数迅速增加，糖尿病也已成为21世纪世界范围内的一种流行病。在中国，糖尿病患病人数现已高达1.14亿，成为继肿瘤和心脑血管疾病之后的第三个严重危害人民健康的重要慢性非传染性疾病，糖尿病高并发症的发生导致高致残率和高致死率，给家庭和社会带来沉重的负担。

胰岛素治疗是控制血糖和治疗糖尿病的重要手段。随着临床用药的不同需求和胰岛素技术的不断发展，人们开发出了具有不同作用时效的胰岛素类似物，如速效胰岛素类似物门冬胰岛素和赖脯胰岛素，长效胰岛素类似物甘精胰岛素和地特胰岛素，长效胰岛素是口服药物失效时联合治疗的首选用药。

德谷胰岛素是一种新型超长效胰岛素，其分子结构特点是去掉人胰岛素B链30位苏氨酸，通过1个谷氨酸分子将16碳脂肪二酸侧链连接在B29位赖氨酸残基(参见专利WO2005012347)，其作用特点是半衰期长，体内作用时间超过42小时，并且低血糖发生率低，具有平稳的药代动力学特点，可以持久、平稳、长期降糖。

结晶是原料药生产的重要环节，而结晶后的德谷胰岛素具有均一的晶型，颗粒大，沉降快，易与上清分离，冷冻干燥时间短，更适合工业化生产；并且以固态晶体形式存在的德谷胰岛素，相比较于不定形固体粉末以及溶液状态的形式，对于产品稳定性、贮存性能等均更有优势。因此，迫切需要研究德谷胰岛素的结晶工艺。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种德谷胰岛素结晶的制备方法。该制备方法可大规模地制备高质量和高收率的德谷胰岛素-锌结晶。该晶体具有稳定的固体分子形式，颗粒大，沉降快，易与上清分离，冷冻干燥时间短，生产效率高，易于放大工业生产。

本发明的另一目的在于提供所述德谷胰岛素结晶的制备方法的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种德谷胰岛素结晶的制备方法，包括如下步骤：在0.05～0.27M组氨酸体系，并且含体积百分比8～15％有机溶剂的条件下，从含有德谷胰岛素、锌离子、酚类物质及盐的结晶液中，在pH值为6.5～8条件下使德谷胰岛素结晶，得到德谷胰岛素结晶。

所述的德谷胰岛素结晶的制备方法，优选包含如下步骤：

(1)配制含有0.05～0.27M组氨酸、1～8g/L德谷胰岛素、体积百分比为8～15％的有机溶剂、质量体积百分比为0.2～0.5％的酚类物质、0.3～2.4M盐的结晶液；

(2)调节结晶液pH值至6.5～8，加入锌离子，锌离子的用量按锌离子与德谷胰岛素按摩尔比(2～15)：3计；结晶；

(3)然后在2～8℃条件下静置结晶，获得稳定的德谷胰岛素结晶。

步骤(1)和步骤(2)宜在1～30℃条件下进行，优选为10～30℃，更优选为20～28℃，最优选为25℃。

德谷胰岛素因修饰脂肪酸侧链与其他胰岛素差异较大，所以结晶较为困难，结晶过程中组氨酸的加入以及pH值的调节是影响结晶效果的关键因素。