[发明专利]地皮消的繁殖方法

权利要求书

1.一种地皮消的繁殖方法，其特征在于，包括将消毒灭菌处理后地皮消外植体先后接种于不同的培养基中进行愈伤组织诱导、丛芽发生和增殖同步培养步骤；

所述愈伤组织诱导的步骤包括：

步骤1：将消毒灭菌处理后地皮消外植体接种于培养基A中：

MS培养液

培养条件：在光照度1500-2000lx，光照时间12h/d，温度控制在22±1℃的条件下进行愈伤组织诱导，培养20d后出现质地紧密的愈伤组织，继续培养20d后愈伤组织分化出大量致密丛生芽，将丛生芽切割为3-5株一丛，转接至相同的新培养基A中继续培养20d，丛芽繁殖为增殖芽；

其中，所述外植体为生长健壮的野生植株带芽茎段，按1.5-2.0cm长度切取；

所述丛芽发生和增殖同步培养包括以下步骤：

步骤2：将步骤1培养的增殖芽切割为3-5株一丛，转接至培养基B中：B₅培养液

培养条件：在光照度1500-2000lx，光照时间12h/d，温度控制在22±1℃的条件下继续培养40d；

步骤3：将步骤2培养的增殖芽按40d的生长周期轮流接入培养基A和培养基B中进行增殖，直到丛芽高3-4cm；

步骤4：取步骤3丛芽中高3-4cm的健壮主苗接种于培养基C中：MS培养液

培养条件：

在光照度1500-2000lx，光照时间12h/d，温度控制在22±1℃的条件下，培养45d获得苗壮根粗的生根苗；

步骤5：取步骤4中6-8cm高的生根植株置于室温下炼苗3d后，从培养基中取出幼苗，将残留培养基清洗干净，放入质量浓度0.1-0.2％的多菌灵溶液中消毒2-3min，后移栽至消毒后的腐殖质中保温保湿培养，生长30d后，即得移栽苗。

2.根据权利要求1所述的地皮消的繁殖方法，其特征在于，步骤1中所述消毒灭菌处理的方法为：先用自来水清洗表面的泥土和灰尘，再放到流水下冲洗2h后，置于超净工作台上用体积比为75％的酒精消毒60s，再用质量百分比为0.1％的HgCl₂灭菌6min，最后用无菌水冲洗若干次后放在无菌滤纸上吸干表面水分，最终得到消毒灭菌处理的外植体。