[发明专利]表达和分泌人干扰素α2b的乳杆菌菌株及其用途

权利要求书

1.一种表达IFN-α2b蛋白的质粒，其通过将SEQIDNo:1的人IFN-α2b编码区克隆到pOSEL144中的NheI和MfeI位点而获得，所述质粒中的表达盒包括P₂₃启动子、卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)S-layer基因从核糖体结合位点到信号肽酶切割位点的信号序列以及在3’末端带有TAA终止密码子的IFN-α2b成熟蛋白编码区，所述基因表达盒的序列如SEQIDNo:2所示。

2.包含权利要求1的表达质粒的宿主细胞。

3.权利要求2的宿主细胞，所述宿主细胞的亲代细胞是乳杆菌细胞，优选是是詹氏乳杆菌(Lactobacillusjensenii)阴道分离株1153。

4.一种pUC18erm衍生质粒，其通过将SEQIDNo:2的人IFN-α2b基因表达盒克隆到pUC18erm衍生载体的XbaI位点而获得，所述衍生载体包含詹氏乳杆菌1153的pox1DNA的片段(～2.8kb)，并在中点通过定点突变引入防止形成融合蛋白的框内终止密码子和唯一的XbaI限制酶切位点。

5.一种乳杆菌，其染色体中整合有SEQIDNo:2的人IFN-α2b基因表达盒，优选是通过将权利要求4的质粒转化到亲代宿主细胞中发生同源重组及分离而获得。

6.权利要求5的乳杆菌，其亲代细胞是詹氏乳杆菌阴道分离株1153。

7.包含权利要求5或6的乳杆菌的药物，优选是阴道栓剂、阴道胶囊、阴道预充式推进器的形式。

8.权利要求5或6的乳杆菌用于制备预防或治疗人乳头瘤病毒(HPV)和人单纯疱疹病毒(HSV)感染或相关癌症的药物的用途。

9.包含权利要求5或6的乳杆菌作为佐剂的疫苗。

10.权利要求5或6的乳杆菌作为疫苗佐剂的用途。