[发明专利]一种强极性有机酸碱混合物的同时提取分离分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种水样中强极性有机酸碱混合物的同时提取分离分析方法，具体涉及动态改性固相萃取结合离子对高效液相色谱法用于环境水样中多种强极性离子型药物中间体的同时提取分离分析方法。

背景技术

在化学药物合成反应监测、环境污染监测、兽药残留分析及体内药物分析中，多种极性药物尤其是强极性离子型混合物的同时提取及分离分析是其中重要的步骤。环境样品或生物样品中的非极性和弱极性化合物的提取和分离采用通常的液液萃取或固相萃取结合反相液相色谱法，可以有效的分离和分析。然而，在实际工作中，有时需要对样品中一些强极性的酸性、碱性和/或两性有机化合物的混合物进行同时提取和分析，由于其药物本身的极性和酸碱性、溶剂的极性和溶解性、样品基体干扰等诸多因素的影响，难以对这些化合物同时萃取和分析。在一些样品中，有机酸或有机碱也可以分别采取相应的阴离子或阳离子交换树脂提取，而强极性的有机酸、有机碱和/或两性化合物的同时提取难以用普通的液液萃取和固相萃取来解决。比如，阳离子交换树脂可以萃取碱性药物，但是不能同时萃取酸性药物或其它弱极性、非极性药物。

β-内酰胺类抗生素(β-lactam antibiotics)是指化学结构中含有β-内酰胺环的一类抗生素，主要为青霉素类和头孢菌素类，由于该类抗生素作用强、毒性低、抗菌谱广，因而应用十分广泛。在合成阿莫西林等β-内酰胺类抗生素时，反应体系中先后要用到对羟基苯甘氨酸(p-HPG)、对羟基苯海因(p-HPH)和6-氨基青霉烷酸(6-APA)等中间体，随着工艺的不同，有的反应系统中还存在少量苯乙酸(PAA)。因此在抗生素实际生产过程中，工厂废水排放中可能会存在这些中间体的一种或数种，在对工厂周边环境水样进行监测分析中，需要一种能同时提取和分析这些中间体的方法。由于p-HPH，p-HPG，6-APA和PAA均属于强极性离子化合物，而且p-HPG和6-APA为强极性两性化合物，p-HPH和PAA为强极性酸性化合物，在环境水样中的这些药物的同时提取很困难。目前对这类强极性有机酸碱一般采用单独提取和分析的方法，费时费力。此外，在常规反相液相色谱分析中，p-HPH，p-HPG和6-APA的保留时间很短，很难与其它杂质有效分离。这些情况表明，需要开发有效的样品前处理方法和液相色谱分离方法来用于这些强极性有机酸碱混合物的同时提取和分析。

这项研究的目的是建立一种适合环境水样中β-内酰胺类药物多种强极性中间体的同时提取分析方法。

技术内容

为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提供一种强极性有机酸碱混合物的同时提取和分析方法。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种强极性有机酸碱混合物的同时提取和分析方法，其特征在于：采用表面活性剂动态改性ODS固相萃取柱与离子对色谱法联合使用；所述表面活性剂动态改性ODS固相萃取柱由以下步骤制备：

依次用甲醇、磷酸溶液活化ODS固相萃取柱后，上样适量表面活性剂SDS，对ODS固相萃取柱进行动态改性，使萃取柱吸附上饱和的SDS。

为了增加ODS固相萃取柱的活化效果，上述磷酸溶液优选体积百分浓度为0.05％磷酸溶液。

为了进一步增加萃取柱上SDS的吸附效果，优选表面活性剂SDS的浓度为20mmol/L。

表面活性剂SDS的用量由本领域技术人员根据实际情况确定。

上述SDS改性固相萃取方法适用于p-HPG，6-APA和PAA的有机酸碱混合物的同时提取分析。

所述的离子对色谱法包括以下内容：以ODS硅胶柱为液相色谱固定相，庚烷磺酸钠与磷酸的水溶液与甲醇组成的混合溶液为流动相，采用225nm波长检测。为了增强分离效果，采用梯度洗脱分离。

庚烷磺酸钠的浓度，磷酸溶液的pH值，甲醇的初始比例，以及梯度洗脱时间，由本领域技术人员依具体情况确定。

上述离子对色谱法，适用于含p-HPH，p-HPG，6-APA和PAA的有机酸碱混合物的同时分离分析。

具体的说，

一种强极性有机酸碱混合物的同时提取和分析方法，用于同时分析p-HPH，p-HPG，6-APA和PAA，或同时提取分析p-HPG，6-APA和PAA，其特征在于：采用表面活性剂动态改性ODS固相萃取柱与离子对色谱法联合使用；所述表面活性剂动态改性ODS固相萃取柱由以下步骤制备：

依次用甲醇、0.05％磷酸溶液活化ODS固相萃取柱后，上样适量20mmol/L的表面活性剂SDS，对ODS固相萃取柱进行动态改性，使萃取柱吸附上饱和的SDS。

进一步，