[发明专利]一种吲哚菁绿复合纳米颗粒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种吲哚菁绿复合纳米颗粒，其特征在于，所述吲哚菁绿复合纳米颗粒包括吲哚菁绿、疏水性多聚物、聚乙二醇衍生化磷脂和癌细胞膜，所述吲哚菁绿被所述疏水性多聚物环绕并与所述疏水性多聚物构成类球形结构，所述聚乙二醇衍生化磷脂穿插于所述癌细胞膜中并与所述癌细胞膜构成囊泡结构，所述类球状结构包覆于所述囊泡结构中，所述吲哚菁绿、疏水性多聚物和聚乙二醇衍生化磷脂的质量比为(0.25-1.5)：1：(0.09-0.27)，所述癌细胞膜来源于癌细胞，所述癌细胞的个数与聚乙二醇衍生化磷脂的质量比为(10⁸-10⁹)：180μg；所述吲哚菁绿复合纳米颗粒的粒径为90-180nm。

2.如权利要求1所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒，其特征在于，所述疏水性多聚物与所述聚乙二醇衍生化磷脂的质量比为1：(0.15-0.21)。

3.如权利要求1所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒，其特征在于，所述癌细胞膜包括肝癌细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、宫颈癌细胞中的一种或多种，所述疏水性多聚物选自聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸和聚己内酯的一种或多种，所述聚乙二醇衍生化磷脂为聚乙二醇通过共价键和磷脂类物质相连得到，所述聚乙二醇的分子量为200～20000。

4.一种吲哚菁绿复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取癌细胞，提取癌细胞膜；

(2)制备囊泡结构：将提取后的癌细胞膜按癌细胞的个数与聚乙二醇衍生化磷脂比为(10⁸-10⁹)：180μg进行称量，并溶解于第一溶剂，在冰浴下超声3-6min，得到第一混合溶液；

(3)制备类球形内核：将吲哚菁绿溶解于第二溶剂得到吲哚菁绿溶液，将疏水性多聚物溶于第三溶剂得到疏水性多聚物溶液，将疏水性多聚物溶液逐滴加 入到吲哚菁绿溶液中，用超声波进行超声2-4min，得到第二混合溶液；

(4)将步骤(2)中所述癌细胞囊泡溶液加入到步骤(3)所述第二混合溶液中，超声混合2-4min，得到第三混合溶液，将所述第三混合溶液进行离心处理，收集上清液得到吲哚菁绿复合纳米颗粒，所述吲哚菁绿复合纳米颗粒包括吲哚菁绿、疏水性多聚物、聚乙二醇衍生化磷脂和癌细胞膜，所述吲哚菁绿被所述疏水性多聚物环绕并与所述疏水性多聚物构成类球形结构，所述聚乙二醇衍生化磷脂穿插于所述癌细胞膜中并与所述癌细胞膜构成囊泡结构，所述类球状结构包覆于所述囊泡结构中，其中，所述吲哚菁绿、疏水性多聚物和聚乙二醇衍生化磷脂的质量比为(0.25-1.5)：1：(0.09-0.27)；所述吲哚菁绿复合纳米颗粒的粒径为90-180nm。

5.如权利要求4所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述提取癌细胞膜具体为：取消化后的癌细胞，加入pH＝7.5的Tris-HCl低渗缓冲溶液，均质破碎、低速离心5-10min，收集上清液，高速离心15-30min，再收集上清液，再对上清液进行超高速离心40-60min，收集沉淀，并用缓冲溶液清洗沉淀，得到纯化后的癌细胞膜，其中所述低速离心的离心力为3200g，所述高速离心的离心力为20000g，所述超高速离心的离心力为100000g。

6.如权利要求4所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述第一溶剂为乙醇、甲醇和水中的一种或多种，所述第二溶剂为乙醇、水或甲醇中的一种或多种，所述第三溶剂为乙腈和丙酮中的一种或多种。

7.如权利要求4所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述疏水性多聚物与所述聚乙二醇衍生化磷脂的质量比为1：(0.15-0.21)。

8.如权利要求4所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步 骤(2)、(3)、(4)中所述超声是采用超声波细胞破碎仪以20kHz的频率和35W的功率而进行。

9.一种如权利要求1-3任一项所述的吲哚菁绿复合纳米颗粒在制备肿瘤热疗药物中的应用。