[发明专利]一种蛋白曝光Marker制备方法在审
| 申请号： | 201510307032.0 | 申请日： | 2015-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN104862332A | 公开（公告）日： | 2015-08-26 |
| 发明（设计）人： | 华权高;沈鹤霄;马峰 | 申请（专利权）人： | 武汉华美生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K16/12 |
| 代理公司： | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人： | 房德权 |
| 地址： | 430223 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 曝光 marker 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种蛋白曝光maker的制备方法，其特征在于：根据所需蛋白曝光marker分子量选择带有不同融合标签的表达载体，PCR扩增得到protein G基因，将protein G与所述带有不同融合标签的表达载体通过酶切酶连得到不同大小的protein G重组蛋白的表达载体，然后转化宿主细胞，诱导表达得到不同大小的protein G重组蛋白，最后经纯化得到不同分子量的蛋白曝光marker。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的蛋白曝光maker分子量为10-120KD之间。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述带有不同融合标签的表达载体包括：pET28a、pET32a、pGEX 6P-1和pMAL-c2x。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述宿主细胞为大肠杆菌。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：得到不同分子量的蛋白曝光marker后，通过SDS-PAGE检测蛋白分子量和纯度。
6.按照权利要求1的制备方法制备的蛋白曝光maker的应用，其特征在于：根据蛋白曝光Marker所需条带大小，选择纯化后的相应大小蛋白进行混合、分装，即可作为曝光Marker的示踪蛋白。
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