[发明专利]BRCA1基因g.41244291delT突变及其在乳腺癌辅助诊断中的应用

说明书

本发明属于基因工程及肿瘤医学领域，公开了BRCA1基因g.41244291delT突变及其在乳腺癌辅助诊断中的应用。该BRCA1基因突变与BRCA1正常基因序列相比具有g.41244291delT位点移码突变。本发明提供了乳腺癌致病的新的突变位点，可用于早期诊断乳腺癌。

发明领域

本发明属于基因工程及肿瘤医学领域，涉及BRCA1基因g.41244291delT突变及其在乳腺癌辅助诊断中的应用。

背景技术

乳腺癌是全球第二大常见恶性肿瘤，在女性恶性肿瘤中居首位。据世界卫生组织国际癌症研究中心统计，2012年全球女性乳腺癌新发病例达167万，占全部女性恶性肿瘤发病的25％。同时乳腺癌是全球第五位常见的恶性肿瘤死亡原因，居女性恶性肿瘤死亡原因之首，全球共52万人因乳腺癌死亡，占所有女性恶性肿瘤死亡的14.7％。而2012年，中国女性乳腺癌新发病例18.7万，发病人数仅次于肺癌，其中4.8万女性因乳腺癌死亡，居女性恶性肿瘤死亡的第六位。

乳腺癌是具有很强遗传背景的恶性肿瘤，5-10％的乳腺癌是因为携带高外显率的乳腺癌易感基因突变所致。BRCA1，BRCA2，TP53，PALB2，PTEN，CHEK2，ATM，RAD50等被认定为乳腺癌易感基因，携带这些基因胚系突变的乳腺癌被称为遗传性乳腺癌，其中至少10％的遗传性乳腺癌是由于BRCA1突变所致。

突变位点的存在被认为赋予了个体不同的表型性状，以及对于环境暴露、药物治疗等因素的不同反应性，因此突变位点可能是导致个体对常见疾病发病易感性差异的重要遗传基础。将疾病的突变位点谱用于疾病的辅助诊断，具有广阔的应用前景。近年来，利用突变位点对疾病进行辅助诊断已经成为临床和科研工作者的研究热点，在肿瘤、先天性疾病和心脑血管疾病等常见重大疾病上的应用价值已初见端倪。

携带BRCA1功能性突变的个体极有可能发展为乳腺癌患者，尤其是乳腺癌家族史携带者。针对突变携带者采取一系列的预防措施，例如较早的进入乳腺癌筛查，并提高筛查频率，以及预防性手术的实施将早期发现乳腺癌而取得较好的干预和治疗效果。中国的BRCA1基因检测起步较晚，尽管有几项相关的研究，但是尚未发现足够量的突变“热点”，尤其是中国人群特异的乳腺癌相关突变。并且由于种族差异，欧美国家的突变谱也不完全适用于中国人群，若能筛选出乳腺癌发病相关的突变位点作为生物标志物，并研制相应的诊断试剂盒，对我国乳腺癌筛查和早期诊断必将是一次有力的推动。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有新的突变位点的BRCA1突变基因。

本发明另一个目的是提供检测上述突变位点的特异性引物。

本发明第三个目的是提供上述BRCA1突变基因及特异性引物在制备乳腺癌辅助诊断试剂盒中的应用。

本发明第四个目的是提供一种乳腺癌辅助诊断试剂盒。

发明人通过分离和研究乳腺癌患者及与其年龄匹配的健康对照外周血DNA中的突变，寻找与乳腺癌相关的高特异性的突变位点，并研制出可临床或人群应用的乳腺癌辅助诊断试剂盒，为乳腺癌的筛查和诊断提供支持。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

一种用于乳腺癌辅助诊断的BRCA1突变基因，该突变基因与BRCA1正常基因序列相比具有g.41244291delT位点移码突变。

用于检测上述BRCA1基因的突变位点的特异性测序引物，其上游引物的序列如为SEQ ID NO.3所示，下游引物的序列如SEQ ID NO.4所示。

用于检测上述BRCA1基因的检测方法，该方法采用Sanger测序方法，使用PCR扩增引物，对BRCA1基因进行突变检测；其中PCR扩增引物的上游引物的序列如为SEQ ID NO.3所示，下游引物的序列如SEQ ID NO.4所示。